丙肝抗体胶体金方法检测的假阳性如何避免?
北京大学人民医院张正教授:丙肝抗体临床检验使用胶体金方法判为假阴性应十分慎重。标准合格的抗—HCV试剂条本身应有:阳性质控带,检测时只有质控带出现后方能判定标本结果。从检验方面避免假阴性首先要求试剂合格,买后应有验证,验证合格试剂贮存于要求条件下,使用时在效期内。另外标本应合格(无溶血、乳糜等,够量),运送条件无误。
特别需要注意,在慢性丙肝患者中,病程有间断发作的特点,慢性患者某次检测抗体由阳转阴应复测,并结合其他结果(HCV-RNA,转氨酶等)判断患者是否进入静止期,在此期内抗—HCV也会有一定程度下降。复测仍阴性应提醒临床注意患者是否出现其他致免疫功能低下疾病(如肿瘤、肾功能不全、SLE等免疫病)或使用免疫抑制剂,使患者产生抗体能力受影响而抗—HCV出现阴性,此类患者不属假阴性。
广州南方医院检验科裘宇容主任:
1.试剂盒的选择:目前实验室用的丙肝抗体检测试剂盒都是第三代试剂,其包被的抗原片段是C+NS3+NS4+NS5或C+NS3+NS4,有研究显示NS5对于灵敏度提升有限但是会降低检测特异性,因此目前有些试剂盒不加NS5抗原。Core抗原中的N端保守区域易产生交叉反应,适度减少Core抗原的配比,可以减低非特异反应,降低假阳性率。因此试剂盒中包被抗原的比例的不同试剂盒的灵敏度和特异性也会不一致。因此选择一家好的试剂盒是非常重要的。
2.标本避免溶血。
3.标本完全凝固后再进行离心分离血清,避免血清中仍残留部分纤维蛋白原,导致假阳性结果。
4.最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管,避免细胞污染。
5.操作时,一定要按试剂盒说明书要求进行操作,尤其是结果判读一定要在试剂盒规定的时间范围内进行。否则时间延长容易出现假阳性结果。
6.筛查试剂,都存在假阳性问题,我们只能尽可能地降低假阳性率。由于胶体金方法的局限性,阳性结果的标本最好用其它方法的试剂(ELISA法或化学发光法)进行复查,两者结果一致,结果发出,并建议做核酸确认试验,若两种方法的结果不一致时,可再选择一种方法学试剂进行复查。
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