cdngt 发表于 2016-9-26 15:40:45

腺病毒载体操作手册中文版


腺病毒载体操作手册中文版

腺病毒重组系统

AdEasyTM操作手册

目 录

第一章 简介
第二章 应用重组腺病毒的优点
第三章 AdEasyTM 技术
3.1 技术概况
3.2 AdEasyTM系统中产生重组腺病毒的时程
第四章 主要流程   
4.1 将基因克隆入AdEasyTM转移载体
4.1.1克隆的一般原则   
4.1.2构建重组AdEasyTM转移载体
4.2 细菌内AdEasyTM重组子的产生
4.2.1共转化的一般原则   
4.2.2共转化方法
4.2.3预期结果
4.3 AdEasyTM重组质粒的筛选和扩增
4.4 AdEasyTM重组子转染QBI-293A细胞
4.4.1细胞铺板
4.4.2磷酸钙转化技术
第五章 常用技术
5.1 QBI-293A细胞培养
5.1.1QBI-293A细胞的初始培养   
5.1.2QBI-293A细胞的维持培养和增殖
5.1.3QBI-293A细胞的冻存   
5.2 QBI-293A细胞的转染和病毒空斑的产生
5.2.1感染QBI-293A细胞
5.2.2病毒空斑形成
5.2.3琼脂糖覆盖被感染细胞
5.3 MOI测定
5.4 腺病毒感染力测定
5.4.1X-Gal染色
5.5 重组腺病毒的筛选和纯化
5.5.1挑选最佳重组腺病毒:表达和基因输送   
5.5.2病毒空斑挑选和小量扩增
5.5.3Western杂交   
5.5.4Southern杂交和点杂交
5.5.5病毒裂解产物
5.5.6免疫测定   
5.5.7功能测定
5.6 病毒颗粒在QBI-293A细胞中的大量扩增
5.7 两次氯化铯密度梯度离心纯化重组腺病毒   
5.7.1不连续密度梯度离心   
5.7.2连续密度梯度离心
5.7.3病毒溶液去盐和浓集   
5.8 病毒滴度测定
5.8.1O.D.260 nm (VP/ml)
5.8.2空斑测定法   
5.8.3 50%组织培养感染剂量法   
第六章 疑难解答
6.1 QBI-293A细胞培养   
6.2 感染力测定
6.3 转移载体克隆
6.4 在BJ5183细胞中共转化和重组
6.5 转染QBI-293A细胞
6.6 筛选和测定
6.7 在QBI-293A细胞中表达
6.8 重组腺病毒的扩增
6.9 纯化
6.10 病毒滴度测定
全文如下:**** Hidden Message *****

cdngt 发表于 2016-9-26 15:41:29

为保护原创,适当进行隐藏限制,回帖可见:)

hantavirus 发表于 2016-9-27 07:16:02

感谢楼主分享http://www.virology.com.cn//mobcent//app/data/phiz/default/23.png

指间流沙 发表于 2016-10-21 08:38:33

找了好久终于找到了,赶紧研究一下!

zengzhiyong 发表于 2016-10-22 09:47:35

谢谢分享

dianhh012786 发表于 2016-10-27 08:40:39

谢谢分享,很全面的信息哦

杨杨杨 发表于 2016-11-7 19:04:02

谢谢楼主分享!

序道 发表于 2016-11-8 12:37:25

好东西

luil121 发表于 2016-11-9 10:39:24

谢谢分享

摇一摇病毒 发表于 2016-11-25 20:18:13

学习交流

摇一摇病毒 发表于 2016-11-25 20:24:43

怎么不能下载

Biodog 发表于 2016-12-1 19:35:18

感谢分享

杨仔儿 发表于 2017-3-29 10:54:58

4555555555555555555555555

zxling1981 发表于 2017-3-30 11:00:03

腺病毒载体

xiaogang 发表于 2017-3-30 13:19:53

我为了看,给楼主点个赞
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