[转移贴]-贴几张清晰的流感病毒鸡胚接种的照片交流
原帖由lgn9shlw 发表于 13/4/2011 09:39http://images.haotui.com/dz7/default/attachimg.gif http://imga1.haotui.com/userdirs/2/a/biosky/attachments/month_1104/11041309394dcfce8ccbe8fc01.jpg 下载 (365.49 KB)
开蛋
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接种
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封蛋
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培养
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开蛋
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掀膜
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吸取尿液
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吸取羊水
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收获液
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Clair
收了，以后开展鸡胚可以拿出来用。
Clair
收了，以后开展鸡胚可以拿出来用。
ppaa ：
收了那么多啊？ 另外问一下你接种在鸡胚的哪个部位啊？？
lgn9shlw：
原始标本采用羊膜腔和尿囊腔双腔接种，收获时收取羊水和尿液。病毒传代直接种尿囊腔，收获尿液
elsielulu84 ：
标记一下~
zz7542 ：
很清楚啊
Mac依然 ：
太牛了，给力
请问收胚的时候尿囊液和羊水怎么区分，我以前好像会把羊水一并当尿囊液收了
mimimi：
第一次见这个场景
lgn9shlw ：
9# Mac依然掀膜的时候要小心，不要把羊膜弄破，只是掀开脏膜层和绒毛尿囊腔。用镊子把胚体推向一边，然后尽量吸取尿液，等尿液吸尽后，可见一个充盈液体的包囊，包裹着胚体，这个就是羊膜和羊水，最后刺破羊膜吸取羊水就可以了。尿液一般可以收获6-9ml，羊水一般在1-2ml左右。个人感觉，甲型流感感染的鸡胚羊水较少，收获时可用尿液冲洗羊膜腔以求得到尽量多的病毒
chyao_123：
图片很清楚！
如果lz能够给大家提供接种部位的图片就更好了 。
kz1015：
很不错的图片啊，谢谢
douding：
果然比较专业。请问楼主，开孔的器械叫什么？哪里买的？
我们实验室用剪刀尖解决的，呵呵，比较野蛮。
lgn9shlw：
14# douding 淘宝，雕刻笔
天涯明月刀 ：
很好，我正进行鸡胚操作可以交流啊，不知你接种开那么大一个口能行吗
zhuxiugao：
经典，好图片
lgn9shlw ：
16# 天涯明月刀
是害怕污染么？一般没问题的，这样还能看清鸡胚的位置，接种部位比较准确。如果只选用尿囊腔接种，那么就不需要开这么大的孔。
KK7725：
做鸡胚接种一定要选好透光度比较好得鸡胚，不然到时接种完会看不清得..
我们那时只接种到尿囊腔:lol
daydreamer2：
问下楼主分离率多高？需要几代？是从病人的咽拭子接的吗？接的是经过PCR鉴定阳性的还是经过细胞培养滴度达到8以上的？这两种分离率有无差异？对于PCR阳性但细胞培养滴度低于8的楼主是否也能从鸡胚分离到流感病毒？
lgn9shlw：
22# daydreamer2
哇，好多问题。我们实验室的鸡胚分离阳性率在11%左右。如果是PCR阳性标本，分离阳性率在25%左右，均为直接从原始标本中分离的结果。原始标本接种采用双腔接种，盲传为尿囊腔接种，一般盲传3代。鸡胚接种的标本不以细胞分离培养结果为考量，一般为两种分离方法同时进行。
另外，对于几种亚型的流感病毒，鸡胚分离的效果差异很大。一般季节性H3N2流感病毒（O相），鸡胚分离效果最不理想。个人感觉，分离阳性率大致为：新甲H1\B(Victoria)\季H1>B(Yamagata)>季H3。
yangyufeng ：有点恐怖！
yukingboy：不错 顶一个~
cguangdemu：楼主收获的尿囊液好清啊，我收获的好多都很混得说，不知道是污染还是出现的病变，鸡胚也有不少死得。
lgn9shlw：27# cguangdemu
个人感觉：污染的可能性比较大，可以做个细菌培养加以验证。
一般来说，流感病毒（高致病性禽流感除外）接种鸡胚后，病变是看不到的，鸡胚死亡应属于非特异性死亡，可能是由于标本的毒性或细菌污染导致的。
xufeng263：做个标记，可能用到
douding：鸡胚质量很重要。买的鸡胚质量好的话，几乎没有非正常的死亡
hxq78316：这么做太麻烦了吧！
lgn9shlw：31# hxq78316 跪求简单方法！
pansihuapipi：我们一般只开一个小孔，够针口进去就行，只在尿囊腔接种
yy7200：很清楚，收藏了！
deepblue：
把注射针头用钳子从中间夹断，留下不带针尖的部分（大约1厘米），连上注射器，恭喜你，你已经做好一个打孔器了。用钝头垂直戳蛋壳就可以了。14# douding
^_^：15# lgn9shlw太牛了！我们用注射器针头戳的 所以第一次看见居然有那~~~么大一个洞啊……
谢谢分享！！！！！
^_^ ：11# lgn9shlw 楼主的意思是尿液和羊膜里的羊水都要收？我们上次扩病毒，最后打开后，几个蛋都是混沌的黄色粘稠液，请问这是什么原因？和操作有关吗？谢谢！
beigeerhao：很好 之前找了好久呢 也没有找到 做的挺清晰啊
未知树；41# ^_^ 应该是污染了。。。我们做过几个蛋，有一个浑浊了，是污染的。。
busiyishen：15# lgn9shlw经典！！！！！！一般生产上都是尿囊腔接种
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