rojjer 发表于 2015-8-11 16:56:03

[转移贴]-接种鸡胚获得的流感病毒如何进行细胞传代

原帖由jianghu 发表于 8/5/2012 11:34

流感病毒接种鸡胚后收获尿囊液,直接做了TCID50,稀释至10的-24次方,细胞全部脱落,对照没有问题。感觉该毒种不至于滴度这么高,听说鸡胚获得的病毒需要在细胞上适应才能用。求教如何在细胞上适应,需要传几代?

rojjer 发表于 2015-8-11 16:59:09

119:
测TCID50的话,不用适应。你的是弱毒吗?弱毒的话,细胞脱落就是胰酶的原因。细胞传代不需要适应。因为有些毒对细胞是不敏感的。尤其是弱毒,有些在细胞上的滴度很低,是不适合在细胞上传代的。

jianghu:
若是胰酶原因,可是对照没有问题。因为后面要做中和实验,测TCID50只是想知道滴度。没有人做过鸡胚的毒接在细胞上吗?我先在细胞上传几代试试吧。

hhy1770:请问你使用的细胞是什么细胞?病毒是什么亚型的?一般的流感病毒的CCID50不会太高,在4-8之间。一般流感病毒不能在细胞上传代适应,越传滴度越低,一般传3代后就测不出毒力了。


jianghu:
细胞是MDCK, 病毒是H3。已经传到第三代,马上准备做TCID50。似乎毒力很高,25的细胞瓶,接1ul,48小时细胞就变圆脱落了,而对照细胞就好好的。


beigeerhao:
是啊 接种MDCK细胞几代后病毒滴度就降低了
没听说过流感病毒要在细胞上适应一段时间的流感病毒对细胞有差别吗?听说过细胞适应流感病毒的 细胞对流感病毒是有差别的
稀释到这种程度病毒还能繁殖出来?毒力够强的。本人一般2-5%接种
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