[转移帖]疫苗灭活剂选择
原帖由论坛会员cnbio6216发表于 2008-10-15 09:44 |疫苗灭活剂β-丙内酯（Beta-Propiolactone，BPL）
灭活是指破坏病原体的生物学特性，但尽可能避免影响其免疫原性或破坏血清中补体活性的过程。常用的灭活剂有甲醛、β-丙内酯(BPL)或其他有效灭活剂。
甲醛是一种有强烈刺激性的致癌物质。其既可作用于病毒含氨基的核苷酸碱基（如A,G,U），又可作用病毒壳蛋白。作用于病毒壳蛋白时，易使蛋白质发生交联或病毒颗粒聚集，不能再作用于壳蛋白内的核酸。这样，病原体蛋白的抗原性会遭到严重破坏，并可能有病原体存活；用甲醛灭活时间长，一般需要在37-39℃处理24h以上或更长时间。并且灭活的效果易受温度、pH、浓度、是否存在有机物、病原体的种类和含氮量等因素影响，在研究中应引起注意；残留的游离甲醛，若随疫苗注入机体后，会产生制激性反应。
而β-丙内酯(BPL)在国外已广泛用于各种疫苗的灭活。它是一种杂环类化合物(C3H4O2)，沸点155℃，常温下是无色粘稠状液体，对病毒具有很强的灭活作用。
作用机理：作用于病原体DNA或RNA，改变病毒核酸结构达到灭活目的，而不直接作用于蛋白。
1. 特点：直接作用于病毒核酸，保持免疫原性，强灭活效果。β-丙内酯(BPL)直接与病毒核酸作用，而不作用于壳蛋白，不破坏病原体的免疫原性。
2. 极易水解，无残留，并且水解产物无毒无害。大剂量β-丙内酯(BPL)虽是一种致癌物，但极易水解，在37℃水浴水解2h后消失［1, 2］，其水解为无毒性的人体脂肪代谢产物β-羟基丙酸［3］ 。另外，由于其能在疫苗液体中完全水解，不必考虑在成品疫苗中的残留。
3. 灭活时间短，缩短了疫苗的生产周期。37℃仅需2小时β-丙内酯即可完全水解，灭活时间短，从而显著地缩短了疫苗生产周期，提高了经济效益。
总之，β-丙内酯(BPL)作为疫苗灭活剂,可直接作用于核酸，对病毒的灭活能力很强；不破坏病毒的血凝素抗原, 保持病毒良好的免疫原性；其水解产物对机体无害，接种反应轻。故早在1984年就被选作狂犬灭活疫苗的灭活剂正式使用，现已被广泛应用于各种疫苗。
订货信息（现货）
货号 产品名称 描述 规格
168-21011 Beta-Propiolactone β-丙内酯(β-PL，BPL) 5ml
166-21012 Beta-Propiolactone β-丙内酯(β-PL，BPL) 25ml
分析指标
TEST SPECIFICATION
Appearance Colorless-nearly colorless,clear liquid
Density (20 deg. C) 1.146 - 1.153g/ml
Refractive index n20/D 1.410 - 1.415
Water (measured value)
Assay (capillary GC) min. 95.0%
储存条件： 远离火源，密封，-20°C，避光，通风，干燥
参考文献：
1. Singh H.Laboratory techniques in rabies(Fourth edition)WHO Geneva,1996,234～2 40.
2. Montagnon B,et al.Laboratory techniques in rabies(Fourth edition)WHO Geneva,19 96,285～289
3. M.O.Schmita-Masse,Analyse de La β-propiolactone Par chromatogphie gaz- liquide I.REcherche d'un reside de β-propiolactone dans le Vaccin antirabique PasteurⅡ.Etude de la courbe d'hydrolyse de La β-propiolactone ápH7.4,Journa l of Chromatoyraphy,70(1972):128～134.
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luoronghua发表于 2008-10-16 08:13 | ：
问楼主两个问题。
1.因为β-丙内酯作为灭活剂的浓度非常小（比如我用的是1：4000），需灭活的病毒原液较少，稀释的β-丙内酯大可能一次性用完，那么，稀释后的β-丙内酯怎么保存？-20°C水解情况怎么样？
2.25ml的多少钱一瓶？
谢谢！ pipi302发表于 2009-8-18 12:28 ：
To 楼上luoronghua
1. 尽量不要稀释用的，我也遇到过这种情况，咨询过相关人员，在-20℃水解倒不是很严重，但是在冻化过程中水解的还是比较大的，如果真是量比较少，尽量稀释完使用一次，冻存再用因水解浓度降低而造成参数的改变，一般的实验保证灭活完全还可以，但生产过程中就不允许了。
2. 价格找代理商咨询一下就可以了，反正感觉挺贵的！
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