转移贴-关于流感细胞培养TPCK-胰酶浓度
原帖由hwqstrong 发表于 25/9/2010 13:30弱弱的问一下,在配TPCK胰酶母液时,用的是什么溶剂啊?去离子水or PBS
半拉木匠:
1# hwqstrong
按道理应该都似乎PBS
Rojjer:
这个影响不大吧,这里去离子水和PBS两者的区别在于去离子水是低渗液体,可能会把细胞裂解了,但是我们一般配置的TPCK-Trypsin母液的到工作浓度时需要用PBS或者DMEM稀释的倍数还是比较大的(我的需要稀释200倍)。此时去离子水影响已经不大了,当然用PBS就没有这个顾虑了。 mingming0596:
是啊没什么太大的区别
hwqstrong :
好。谢谢大家!
leceline:
3# Rojjer
请教Rojjer,你的TPCK-Trypsin工作浓度是多大?有没有添加BSA或者牛血清?多大浓度?
我用的2ug/mlTPCK-Trypsin,没添加时细胞都圆缩了,耐受不了.
谢谢 Rojjer:
6# leceline
我们实验室用的是终浓度5ug/ml的TPCK-Trypsin。(母液稀释200倍)
其实查文献就知道从0.25ug/ml到10μg/ml甚至40 μg/ml都有人做过。
一般情况下用2ug/ml较多。
可能是实验室习惯,大家都这样传下来的,我们用的都是5ug/ml,没有加血清或BSA。呵呵 TPCK-Trypsin的说明书你们都看过吗?我看过它的说明书怎么都没看懂啊,说是母液用甲醇配制储存更好。到底是怎么回事啊,你们对流感疫苗细胞培养研究的深吗?给点意见呗
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