中国病毒学论坛|我们一直在坚持！

标题: 中性红和结晶紫染色的区别 [打印本页]

作者: zikavirus 时间: 2016-3-3 22:26
标题: 中性红和结晶紫染色的区别
转贴：

1、中性红为活性染料，其进入细胞膜要求获取储存于活细胞溶酶体的能量而激活，如果细胞膜被任何物质损坏，则其不能被胞吞而储存于细胞内，细胞受损越严重，中性红摄取率更低，检测OD值更小。
neutral red （百度百科）定义：细胞活体染色和酸碱性指示剂的一种碱性吩嗪染料。分子式：C15H16N4.HCl ；深绿色结晶粉末。易溶于水和醇，水溶液呈红色，醇溶液为黄色，其溶液用于染细胞中的液泡,可鉴定细胞死活.活细胞被染成红色，而死细胞不变色。这点和台盼蓝相反。　　原理：中性红是一种弱碱性 pH 指示剂，变色范围 pH6.4～8.0之间（由红变黄）。在中性或微碱性环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌，由于液泡在一般情况下呈酸性反应，因此，进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色，在这种情况下，原生质和细胞壁一般不着色；死细胞由于原生质变性凝固，细胞液不能维持在液泡内，因此，用中性红染色后，不产生液泡着色现象，相反，中性红的阳离子，却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合，而使原生质与细胞核染色。

但是中性红的光吸收峰值是在540nm，这个数值我用连续光谱检测过，另一个峰值在270nm。在其它人的文献中也是在540nm检测。用570nm检测，数值会偏低很多。

2、MTT原理
活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为非水溶性的蓝紫色结晶甲臜（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲臜，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

欢迎光临中国病毒学论坛|我们一直在坚持！ (http://virology.com.cn/)