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标题: 鲑鱼精DNA配置SOP [打印本页]

作者: ellar 时间: 2016-8-31 17:51
标题: 鲑鱼精DNA配置SOP
1. 称取鲑鱼精DNA 2 g置于500 ml烧杯中，加入约200 ml的TE Buffer。
2. 用磁力搅拌器室温搅拌2～4小时，溶解后加入4 ml的5 M NaCl，使其终浓度为0.1 M。
3. 使用氯仿抽提两次。加大约2倍体积，取上面冻状物。
4. 回收水相溶液后，使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次，以切断DNA。
5. 加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。
6. 离心回收DNA后，溶解于100 ml的去离子水中，测定溶液的OD260值。
7. 计算溶液的DNA浓度后，稀释DNA溶液至10 mg/ml。
8. 煮沸10分钟后，分装成小份（1 ml/份)。-20℃保存。
9. 使用前在沸水浴中加热5分钟后，迅速冰浴冷却。

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