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标题: 细胞铺板技巧 [打印本页]

作者: cloudwin 时间: 2015-2-2 09:52
标题: 细胞铺板技巧
本帖最后由 cloudwin 于 2015-2-2 09:59 编辑

本帖转自旧论坛：http://biosky.haotui.com/viewthread.php?tid=4533&extra=page%3D1%26amp%3Bfilter%3Ddigest
原作者：endosome http://biosky.haotui.com/space.php?uid=228
养了两年半细胞了，也铺了两年半板子，各种板子基本都铺过，把自己铺板子的心得和大家交流一下，呵呵。
一般96孔板我每孔是加100微升细胞悬液，从孔的左边靠近底部加入，加完半边板后，将未加的细胞悬液混一下再，继续加剩余的半边板子，都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不好），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。
6孔板12孔板或24孔板，我均采用将第一个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔一次类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多，而加在周边晃匀后周边细胞多中间少的现象，细胞分散较均匀，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板好掌握，效果没有96孔板好，所以我放弃改用浸润孔底的方法。

作者: Anny 时间: 2015-7-30 16:39
x学习了，多谢

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