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标题: 分泌型IgA的分离与鉴定 [打印本页]

作者: cao1976 时间: 2015-7-1 17:21
标题: 分泌型IgA的分离与鉴定
（一）材料与试剂 1．初乳 2．SephadexG200 3．0.10Mol/L pH6.8PB液 4．0.01Mol/L pH7.4PB液 5．DEAE52

（二）操作方法 1．取初乳20ml，10 000rpm离心10min，弃去表面脂肪层及底部的沉淀物。 2．取乳清过SephadexG200柱（柱规格为2.50cm×90cm），以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脱，第一峰为IgA（含IgG）。 3．收集乳液，于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。 4．将透析液浓缩至5mg/ml以上。 5．过DE52层析柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱，洗下蛋白峰为IgG，弃去。 6．换用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS（0.10Mol/L NaCl）液洗脱，收集洗脱液，即为较纯的IgA液。 7．必要时，可再过一次SephadexG200柱。 8．浓缩，鉴定

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