中国病毒学论坛|我们一直在坚持！

标题: [转移贴]咨询转染实验相关的问题 [打印本页]

作者: virology 时间: 2015-7-7 12:58
标题: [转移贴]咨询转染实验相关的问题
原贴由roredia 发表于 2009-12-2 09:31
http://biosky.haotui.com/thread-12888-1-7.html

各位早上好!我有些转染实验相关的问题,想请教一下大家!
      我最近在做转染实验,用的是SF9细胞.转过两次了都没有成功!我觉得可能是质粒!我提质粒是按照英骏公司的说明书里提的,也就是加完溶液I\II\III以后,直接用异丙醇沉淀,然后用酒精洗!我想请教一下,用这种方法提出来的质粒,要再纯化吗?还是可以直接拿来做转染?
      另外,我的培养基是SF-900 II SFM培养基,用的转染试剂是CELLFECTIN II REAGENT.有谁能否给我一个最佳的转染步骤呢?我都是按说明书上做的,都试了两次了也没有成功!感觉细胞还是可以的.希望能在此得到大家的意见和建议!谢谢!

以下为战友回复
----------------------------------------------------
wwwkkk83发表于 2009-12-2 10:11 :这种方法提出来的质粒不需再纯化，可以直接拿来做转染。

没用过CELLFECTIN II REAGENT和SF9细胞细胞

gpj402发表于 2009-12-2 16:36:一般来说是没有问题的，不过我也注意到你没有提到你质粒的量，推测可能的因素是那里；另外，你的报告基因是什么，对质粒的再检查也是有必要的。

欢迎光临中国病毒学论坛|我们一直在坚持！ (http://virology.com.cn/)