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标题: [转移贴]关于异丙醇沉淀Bacmid的问题 [打印本页]

作者: virology    时间: 2015-7-7 13:18
标题: [转移贴]关于异丙醇沉淀Bacmid的问题
原贴由nk0401发表于 2010-9-6 18:09
http://biosky.haotui.com/thread-16766-1-7.html

按照Bac to Bac 的操作说明,溶液1,2,3。但当我在用异丙醇沉淀后,14000,15min,管底可见白色沉淀,当用70%乙醇洗涤后14000,15Min,管底什么都看不见。用水溶解后测浓度,发现浓度相当低。请问大家知道是为什么吗?

我试了3次了,每次都这样,异丙醇可见沉淀,用70%乙醇后就什么都看不到了。谢谢大家。  


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wangyongmei发表于 2010-9-6 22:2:用酒精洗的时候特别容易发生质粒丢失的问题,是不是你洗的时候不小心把质粒洗掉了呢?
nk0401发表于 2010-9-6 23:40 :我是用枪头讲异丙醇吸掉的,白色沉淀肯定没吸去,可加入乙醇后离心就不见了。那个白色沉淀难道不是DNA吗?
stare024 发表于 2010-9-7 09:23 :用枪头吸反而容易把质粒洗下来,建议楼主不要用枪头,
可以轻轻倒掉多余的异丙醇,然后在 吸水纸上倒置EP管,控干。
70%的酒精洗也是一样,你的情况很有可能是在到70%酒精的时候把质粒也倒掉了。







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