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标题: 关于病毒纯化问题 [打印本页]

作者: virology 时间: 2015-7-13 10:55
标题: 关于病毒纯化问题
原贴由了然自得发表于 2012-5-15 16:20
http://biosky.haotui.com/thread-32393-1-2.html

各位invetrogen的Protocol中杆状病毒只能用3代，后来又有个空斑纯化。现在问题是
A. 3代以后的病毒是否可以用？
B. 空斑纯化的病毒能够用几代？
C. 如果大规模培养如何能够满足生产的需要？
（如果进行生产，一般都需要建立三级种子库，8-10代要稳定。如果只是3代远远不能满足生产需要）

以下为会员回复：
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一只蜗牛发表于 2012-5-16 09:28 ：既然是生产，你就检测啊，看N代后，还稳定不。

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yakiry 发表于 2012-8-14 11:08 ：P3代前发生突变的概率比较低，所以大家一般都会选用P2或者P3，实验室或者小规模生产都是足够的了（100L应该是没有问题的）。我不知道你要做多大的规模，现在的WAVE还是挺方便的。空斑实验我做到过P6，表达也是可以的，不过没有做过氨基酸测序，所以也不知道突变没有。理论上传代次数越多越容易突变，你可以bacmid多弄点，转染多几个孔，确认下每个孔蛋白的表达量，提供大量的P2，P3病毒。
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