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标题: 请教：SF-9细胞无血清培养驯化过程中，出现异常,胞浆中出... [打印本页]

作者: virology 时间: 2015-7-14 12:17
标题: 请教：SF-9细胞无血清培养驯化过程中，出现异常,胞浆中出...
本帖最后由 virology 于 2015-7-14 12:19 编辑

原贴由syzhudi 发表于 2013-5-20 10:19
http://biosky.haotui.com/thread-40978-1-1.html

我用的是Invitrogen公司的SF9细胞，培养基也是其sf-900II SFM无血清培养基。买来后复苏后由于情况不太好，一直到7代用的都是加了10%FBS（四季青）的培养基，现在想驯化下（10%到6.67%到3.33%再到0，目前到3.33%fbs），用原来无血清培养基培养。但是到第11代，3个浓度都不同程度的出现了照片中的情况(照片均为传代24h后拍摄)，很多细胞的细胞浆中出现气泡，不知道是否是由于发育不良，如果是，不知道该如何避免或者调整向低血清驯化过程中出现的这种情况？

第二个图是无意中观察到的一个情况，出现了比普通sf9细胞大很多的一个细胞，不知道有没有老师碰到过，是个例还是什么情况，请指教。

图1：3.33%FBS出现气泡40x[/url]
[attach]1013[/attach]

图2出现异常细胞[/url]
[attach]1014[/attach]

作者: virology 时间: 2015-7-14 12:20
wsmcc 发表于 2013-5-23 10:28 ：你好，我的也是invitrogen的sf9，非常难吹下来，用了他们提供的三种方法，一种都不可行。细胞刮会死一大片，基本不成活。
不知道你的有没有这样呢？

作者: virology 时间: 2015-7-14 12:21
syzhudi 发表于 2013-5-24 10:33 ：2# wsmcc

每次大概长到3天90%左右就要传代，这时候挺好吹下来的，如果时间长长过了，就不好吹了。有一次出差回来传代时间过了两三天，再去吹吹了半天才下来一点点。不过只要保证吹下来悬液的细胞浓度也没关系。

作者: virology 时间: 2015-7-14 12:22
宁静的小米发表于 2013-5-31 23:05 ：我这边遇到过细胞出现空泡的现象，应该是细胞营养不良，营养不够，但是你这是要驯化成无血清的，血清浓度降低的过程中，估计肯定会遇到很多细胞营养不良的现象。慢慢筛选，应该能筛选出合适的细胞把，楼主好运

你那个异常细胞是不是气泡呢

作者: virology 时间: 2015-7-14 12:22
syzhudi 发表于 2013-6-4 19:55 ：To 宁静的小米

后面没有再遇到了，只是那一代出现了。当时挺吓人。还是谢谢你

作者: Ascovirus 时间: 2016-12-11 07:08

virology 发表于 2015-7-14 12:22
syzhudi 发表于 2013-6-4 19:55 ：To 宁静的小米

问题解决了，那就太好了。

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