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标题: 什么时候收毒最佳？ [打印本页]

作者: 晚风hit 时间: 2015-2-6 11:26
标题: 什么时候收毒最佳？

最近在扩RSV—long（呼吸道合胞病毒），收了几次毒，滴度有高有低，显微镜下观察扩毒经历了一下几个阶段，加病毒后的第一天零星出现融合现象，第二天4倍显微镜下融合斑大致有20个左右，第三天爆发出现大范围融合现象，融合斑很多，且比较大，大致占细胞面积的70%-80%，第四天90%以上融合且有部分细胞成片脱落的现象。请问在哪一天收毒最好？我在第三天收毒滴度在10*6左右，第四天只有10*5左右，但和其他人的结论不一样，请问有扩过类似病毒的战友吗，求解？这个病毒是负链RNA病毒，有明显的融合现象出现

2# 半拉木匠
第三天到第四天的时候就过了营养问题以及酶释放问题导致了活性损失

3#

Crazy

没做过RSV，不过其他病毒我一般都是考虑在大规模出现病变前收毒。这样收获的病毒，感觉继传的活力更好，哪怕测滴度可能不见得是最高的。
以上为个人意见。
5# 半拉木匠
固定在三天收毒那是经过充分验证的结论，前提是固定MOI下的固定时间收毒，是前人经验甚至于生产工艺。
如果MOI不固定，或者不准确，或者培养体系内其他因素有变化，那么方法只能相对重现，会有一定程度上的偏差，比如变成了2天或者4天。所以要参考一个前人的经验MOI，没得参考就自己检，如果现在无活力检定方法那就直接做一个系列稀释接种量摸索，最终以70~80%病变率为同一收获指标，能达到这个病变率并最晚达到这个病变率的接种量作为固定工艺往后繁殖。病变率达不到这个水平的试验组直接淘汰，因为它一辈子也上不去了：）

作者: gadfly 时间: 2015-2-12 15:05
学习学习了

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