随着现代临床学不断发展，ELISA法比较灵敏,不需特殊设备,可以定性分析,所以应用发展迅速。ELISA手工法已成为领域的现实。但在实际工作中，可能会因操作不当而出现一些异常指标。近几年来笔者在免疫室工作中获得一些经验和体会,现介绍如下:
（1）待检血清应新鲜或冰冻保存,不能污染,否则可出现非特异性反应；较严重溶血,标本易出现假阳性。
（2）在温育时，反应板有时受到异常剧烈的震动，致使有的阳性标本板孔中的液体溅入阴性板孔中，尽管马上洗板，还会造成部分阴性标本的假阳性。原因可能是有时阳性标本浓度太高，种特异性反应比较迅速，一旦失手发生此情况,建议重做。
（3）洗板时：①洗板不彻底，未除去实验中没参与反应的酶类物质,造成HBsAg、HBsAb和HBeAg的假阳性；或HBeAb和HBcAb的假阴性。②加注洗涤液时冲力过大；将包被在固相载体表面的成分脱落导致HBsAg、HBsAb、HBeAg假阴性；或HBeAb和HBcAb的假阳性。
（4）有时我们在加样过程中，常常会遇到别标本未离心等情况，为了节约时间，往往这时我们会先加酶结合物，然后等标本分离好后再加标本，殊不知，这样，竟常常会造成HBeAb和HBcAb的假阴性。因为HBeAb和HBcAb都是竞争抑制法，先加入酶标记的抗体，首先与固相载体上的抗原结合，待加入显色剂后，因酶的存在而显色，故呈阴性。
总之，一点小小的疏忽、失误可能造成检验结果的相悖，给及家属带来物质精神上的损失，给临床确诊带来麻烦。因此，作为检验工作人员，工作中要尽量减少失误，严格遵守操作规程，并及时总结经验，提高我们的检验工作水平，为临床提供可靠的诊断依据。
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