病原体感染诊断新项目临床应用

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演讲者：上海交通大学医学院附属仁济医院检验科主任 李敏教授

　　微生物耐药已经对全球公共卫生构成重大威胁，各国卫生管理部门都应积极采取应对措施，减缓不断上升的病原体耐药现状。WHO对临床微生物实验室要求尽可能把目标集中在快速诊断方面，利用一切手段将实验室数据转化为临床有用的信息，要将感染性疾病防控“关口前移”。我国近期出台一系列抗菌药物临床应用管理措施，目的是提升临床以病原学为基础的目标性治疗。临床微生物实验室也面临前所未有的机遇与挑战，临床迫切需要微生物实验室更快更准的提供鉴定结果，以改善病人护理和提供适当抗生素疗法，微生物实验室也需要快速、准确、方便和便宜技术方法，利用一切手段将实验室数据转化为临床有用信息。

　　随着检验技术的提高及转化医学的发展，目前有一些可以应用在临床上的微生物鉴定及药敏的项目，值得向大家推荐和推广。侵袭性真菌病（Invasive Fungal Disease，IFD），可用G试验、GM试验、隐球菌荚膜多糖抗原等方法进行检测。G实验，检测真菌细胞壁成分1，3-β-D-葡聚糖（BG），适用于除隐球菌和结核菌外的所有深部真菌感染的早期诊断。有较高的阴性预测值，动态变化可反映疗效（需关注假阳性）。GM实验，检测半乳甘露聚糖（GM），适用于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断，动态变化反映疗效（需关注假阳性和假阴性）。隐球菌加膜多糖抗原试验，利用乳胶凝集方法检测血清或脑脊液中隐球菌荚膜多糖抗原GXM，GXM是隐球菌特有的分泌物，可作为隐球菌感染诊断依据。对于怀疑真菌感染或真菌易感高危人群，可先用G实验进行初筛，阳性患者进行GM实验复筛，如果还是阳性结果，怀疑曲霉菌感染；反正，怀疑非曲霉菌感染。而G实验结果阴性的患者，则进行隐球菌抗原检测，阳性怀疑隐球菌感染，阴性则怀疑非隐球菌感染。

　　艰难梭菌感染的检测，可选用艰难艰难梭菌筛选平板（CCFA平板）和梅里埃CDIF培养基进行培养鉴定。艰难梭菌毒素检测A/B ，检测采用两步酶免夹心法与终点荧光检测相结合的技术（ELFA），标本中毒素A/B与包被的抗毒素A抗体和B抗体特异性结合，荧光强度随标本中毒素A和B的含量升高而升高。呼吸道病原体感染具有多样性和多重性的特点，上呼吸道感染指鼻腔、咽、喉部，常见病原为病毒，少数为细菌。下呼吸道感染指气管、支气管、肺部，常由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起，以社区获得性肺炎（CAP）多见。现有呼吸道多种病原体抗原抗体联合检测试剂，有一次性检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感1,2,3型、呼吸道合胞病毒、腺病毒的7项抗原抗体检测试剂，和在此基础上再增加肺炎衣原体、肺炎支原体、立克次体、嗜肺军团菌的9项呼吸道病原体IgM抗体检测试剂，帮助快速提供呼吸道病原体感染鉴定结果。

　　还有检测生物活性物质的项目，如结核菌感染T细胞干扰素释放（T-SPOT.TB）检测、革兰氏阴性细菌内毒素检测、急性时相蛋白PCT和SAA检测等。检测核酸的项目，主要是用于各类感染性病毒的检测及不易常规培养的衣原体、支原体、结核等单一和多种病原体的联合检测等。还有检测菌体蛋白的项目，如MALDI-TOF MS在疑难菌株的鉴定、血培养报阳的直接鉴定、细菌耐药性的快速分析等项目。

　　临床微生物实验室应该充分利用和不断改进新的检测技术和方法，尽早到达WHO对临床微生物实验室功能要求。