[转移贴]-接种鸡胚获得的流感病毒如何进行细胞传代

rojjer

原帖由jianghu 发表于 8/5/2012 11:34

流感病毒接种鸡胚后收获尿囊液，直接做了TCID50，稀释至10的-24次方，细胞全部脱落，对照没有问题。感觉该毒种不至于滴度这么高，听说鸡胚获得的病毒需要在细胞上适应才能用。求教如何在细胞上适应，需要传几代？

rojjer

119：
测TCID50的话，不用适应。你的是弱毒吗？弱毒的话，细胞脱落就是胰酶的原因。细胞传代不需要适应。因为有些毒对细胞是不敏感的。尤其是弱毒，有些在细胞上的滴度很低，是不适合在细胞上传代的。

jianghu：
若是胰酶原因，可是对照没有问题。因为后面要做中和实验，测TCID50只是想知道滴度。没有人做过鸡胚的毒接在细胞上吗？我先在细胞上传几代试试吧。

hhy1770：请问你使用的细胞是什么细胞？病毒是什么亚型的？一般的流感病毒的CCID50不会太高，在4-8之间。一般流感病毒不能在细胞上传代适应，越传滴度越低，一般传3代后就测不出毒力了。  


jianghu：
细胞是MDCK， 病毒是H3。已经传到第三代，马上准备做TCID50。似乎毒力很高，25的细胞瓶，接1ul，48小时细胞就变圆脱落了，而对照细胞就好好的。  


beigeerhao：
是啊 接种MDCK细胞几代后病毒滴度就降低了  
没听说过流感病毒要在细胞上适应一段时间的  流感病毒对细胞有差别吗？听说过细胞适应流感病毒的 细胞对流感病毒是有差别的
稀释到这种程度病毒还能繁殖出来？毒力够强的。本人一般2-5%接种