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[转移贴]-流感病毒培养的问题

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发表于 2015-9-22 22:36:31 | 只看该作者 回帖奖励 |正序浏览 |阅读模式
yuanfire123  22/2/2011 08:33
用MDCK做流感病毒的培养,如果用有滴度的病毒收获液复种,是不是要稀释,要的话稀释多少倍?接种的病毒量过多会出现什么情况?谢谢


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 楼主| 发表于 2015-9-22 22:38:53 | 只看该作者
hhy1770 :
应该按MOI计算接种量,一般是0.01-0.1MOI的接种量,接种量过大的话,是细胞病变加快,影响病毒收获液的滴度。还有就是流感病毒在细胞中培养会逐渐失活,一般传2-3次后就测不出收获液的滴度了

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 楼主| 发表于 2015-9-22 22:37:41 | 只看该作者
virologik :
如果滴度很高的话,可以稀释5-10被,吸附细胞1h,再加维持液培养。如果滴度不高,直接吸附细胞。
接种的病毒量过多会出现什么情况?
过多的话,细胞病变太快,造成细胞过早脱落,不易看到病变过程,无法区别是CPE导致的,还是非特异性其他因素导致的。


lgn9shlw
若滴度小于1:8,则原液直接接种。滴度大于等于1:8,则原液做1:100的稀释后接种。
接种病毒量大,轻则会影响病毒自身的复制,使滴度无法提高到预期的程度。重则会导致细胞快速凋亡,直接影响病毒的分离。
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