水痘病毒Ellen株(ATCC VR-1367)的复苏、冻存

liyaodong

实验室新购买了水痘病毒Ellen株(ATCC VR-1367)，但是说明说给的很简略，之前也没操作过，所以想请教高手。不胜感激！！！
1、打算用MRC-5细胞复苏，复苏时接菌量怎么定呢？
当细胞单层后（25平方厘米的培养瓶），倒掉培养液，用1*PBS洗涤细胞面，然后将病毒（1ml）加入到培养瓶，吸附，再加入10ml的维持液进行培养。这么操作对么？

如果病毒是冻干粉，要用什么液体进行复溶呢？

2、收毒后进行冻存，想用两种方法，有细胞悬液和无细胞悬液两种方法。因为下一步想用病毒免疫动物，以获得血清，那么加入何种保护剂不影响毒力呢？保护剂的比例（最终比例）是多少？两种冻存的方法加入的保护剂可以相同么？
   冻存时需要梯度降温么？我们打算-80度或者液氮冻存
   
   冻存液用什么呢？

ipsvirus

没做过痘病毒，期待大神来回答。
1.ATCC上有推荐用什么细胞扩毒吗？一般扩毒的时候不用加很多病毒，1mL很多了，病毒浓度10^4-5的，加100-200ul就行，让病毒复制扩增。而且不是买回来就扩毒，是要在细胞上传几代，让病毒适应，然后再扩。
2.我们是直接冻上清病毒液，而且没有什么保护剂，冻融一次是会损失一半左右的病毒，所以分装冻-80度就好了。

ghx0123

水痘病毒都是OKa株，能问一下这个毒株是用来干什么的吗？