[转移贴]-求助，关于鸡胚尿囊液的污染

rojjer

yukingboy 28/2/2012 09:37

请教大家一个问题 用收获的鸡胚尿囊液加入到肉汤培养基培养 培养基变浑浊 说明鸡胚尿囊液有污染了 可是在肉汤培养基里面加入青链双抗 庆大霉素和两性霉素B之后 再加入鸡胚尿囊液培养 肉汤培养基一样变浑浊 应该不会是抗生素失效 因为都是新买的 有没有人知道可能会是什么东西污染了鸡胚尿囊液？是鸟粪样接种鸡胚之后收获的尿囊液

rojjer

半拉木匠：
细菌浓度如果很高的话 抗生素是没用的
另外最好取样做一下检测或鉴别 看看到底是不是菌

conan_vs_kid：
想知道你的收获时候取出的鸡胚尿囊液是不是澄清的呢？如果这时候的鸡胚尿囊液不澄清说明已经污染，无菌检查肯定会浑浊，比如一些使鸡胚蛋白变性的东西混入你的接种样品中，会产生这样的情况，还是先检查你接种鸡胚里的样品的无菌试验是否合格，在判定吧

gcw1234：
不知道你收获的时候是怎么收获得，通常使用吸管压着里面组织慢慢的吸，没有污染啊，在无菌超净工作台内，用碘酒、酒精消毒，敲碎蛋壳，全程保证无菌，收获完之后用滤纸过滤之后检查是否有污染。

yukingboy：
看来是染菌的浓度太高了 抗生素已经不起作用了 我已经用细菌和真菌的鉴定引物P过 细菌的有条带 正在做克隆测个序看下到底是什么

rojjer

yukingboy：
3# conan_vs_kid
收获尿囊液的时候死亡的鸡胚已经不是澄清的了 都挺混的  你的意思是说  我先检查一下需要接种的粪样处理过后是否无菌么？  



yukingboy：4# gcw1234
大部分鸡胚都是正常无污染的  可是有几个是死的 又检测不到病毒的存在 所以老板让我找出导致鸡胚死亡的原因 我的操作和你说的一样 你每次收获尿囊液都是过滤之后才冻存起来的么？


半拉木匠 ：
粪便样本是抗生素处理的还是过滤除菌的？
接种的样本本身要是有菌的话接种到SPF鸡胚里那肯定迅速富集生长，样本里的病毒都得被分解喽，并且鸡胚也有可能死亡。
如果尿囊液里有少量细菌生长，那收获后除菌过滤还有意义，要是菌量很大除菌就没必要了，因为里面基本上不会有病毒了。
找鸡胚死亡原因 就不用考虑收获了，除非你是连续收获。
最可能的原因就是接种的样本本身含有一定量的细菌
其次就是操作中引入了细菌。
再次就是接种的时候扎死了


yukingboy：
粪样是抗生素处理过后离心然后接鸡胚，我觉得可能是样品里面含有细菌或是在操作的过程中导致的感染。既然细菌会影响病毒的增殖，那被污染了的尿囊液就没有必要在过滤之后继续传代了。谢谢。