aa220011 发表于 2025-8-26 21:43:18

请教提高病毒在细胞上的侵染复制

本人正在进行采用细胞培养一种病毒。该病毒在贴壁细胞上扩增顺利,病毒会使细胞发生病变,同时滴度较高;但在悬浮细胞上却无法有效扩增,多方查证后发现在悬浮细胞上,该病毒的核酸浓度已达到理想浓度,但活病毒数量却较少。由于在接种病毒于37℃ 72h后,检测病毒的TCID50,病毒滴度仍有3-4/0.1ml,因此考虑初始接种病毒是顺利进入细胞内部,否则无法独立存活3d以上。猜测是病毒感染该细胞后,因培养基中某成分的不足导致病毒的蛋白合成受阻或者是病毒出膜受阻导致无法二次感染。请问各位老师有没有遇到这方面的问题,或者是通过添加某些氨基酸、多肽等添加物改善的经验?

hantavirus 发表于 2025-8-27 21:25:06

贴壁和悬浮培养的是同一种细胞吗?另外所谓悬浮培养是微球载体还是片状载体?还是直接细胞悬浮,如昆虫sf9细胞,或C36细胞?
另外,不同病毒的复制特性也不同,不知道你是哪个病毒,至少说一下是哪个属:)

aa220011 发表于 2025-9-11 20:48:13

hantavirus 发表于 2025-8-27 21:25
贴壁和悬浮培养的是同一种细胞吗?另外所谓悬浮培养是微球载体还是片状载体?还是直接细胞悬浮,如昆虫sf9 ...

不好意思,电脑一直未开没收到消息。没想到还有老师回复了。我这边贴壁和悬浮培养的是同一种细胞,直接无血清全悬浮培养了。目前我这边遇到的是水禽上面的鹅二型星状病毒,它在贴壁细胞上增殖的很好,采用Ct值检测以及荧光抗体检测均能成功检测。但在悬浮细胞上,ct值检测很好,荧光抗体检测却很低。不知道老师有没有什么可以指教一下的。

xiaopihai 发表于 2025-9-11 23:18:00

路过,是不是这个病毒不适应悬浮细胞?
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