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[求助] 病毒浓缩

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发表于 2015-7-20 10:58:24 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
请教:大批量(10升以上)病毒浓缩除了超滤外还有什么好方法?



楼主:zhdd05
原帖链接:http://biosky.haotui.com/thread-3971-1-1.html
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 楼主| 发表于 2015-7-20 10:58:51 | 只看该作者
1。用PEG沉淀,去掉大部分液体;
2。用密度梯度离心。
3。超速离心去蔗糖
可以试一下

2#gywmail
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 楼主| 发表于 2015-7-20 11:00:02 | 只看该作者
连续流超速离心,可以轻松搞定。
另外不知道您手头上的病毒形态是否均一,是否有合适的抗体,如果其形态一致或/和有合适的抗体可供使用,通过亲和层析可以快速、简单地得到高纯度的病毒颗粒。

3#zhanggji
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 楼主| 发表于 2015-7-20 11:00:35 | 只看该作者
使用Millipore 公司的 小型切向流超滤系统 ,可以进行病毒、抗体的浓缩,起始量在200ml以上都行。
建议你咨询Millipore 公司,效果很好,速度也很快。

4#huawenbj
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 楼主| 发表于 2015-7-20 11:01:19 | 只看该作者
根据病毒颗粒的大小,例如FMDV, 利用PEG6000,终浓度7.5%(加NACL调至0.9%),4度搅拌数小时,离心  


8#kmvir
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 楼主| 发表于 2015-7-20 11:01:51 | 只看该作者
先沉淀,然后超速。不过大规模还是超滤为好

10#zijian13
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 楼主| 发表于 2015-7-20 11:02:54 | 只看该作者
浓缩方法有很多,例如低温沉淀法  疫沉淀法 透析法 超滤法 冷冻干燥法,你可以采用这些办法不过这些速度较慢,有条件的话你可以采用超滤的办法进行浓缩.在FISHER 公司有一种超滤的离心管,专门用来浓缩病毒的,只要3000rpm,30min.这方面如果你经验比较多的话可以自已自制浓缩病毒的制剂,我只能说这么多因为有些病毒的浓缩方法都有很大的差别。

17#Clement
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