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[昆虫病毒] 表达带His-tag的禽流感病毒HA基因杆状病毒转移载体的构建及重组病毒的鉴定

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发表于 2015-5-24 12:15:04 | 显示全部楼层 |阅读模式
原帖地址:http://biosky.haotui.com/thread-652-1-14.html  原帖发布人:SF9cell

《新疆农业大学学报》

Journal of Xinjiang Agricultural University 起止页码:53-55 2005年 28卷 4期

摘 要:经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)1.7kb HA基因的eDNA将其克隆到pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis4.5,筛选到重组质粒命名为rpBacHisH5HA。测序正确后,在脂质体介导下,与线性化的杆状病毒ENA(Bac-N-Blue TMDNA)共转染Sf9昆虫细胞,挑取蓝色蚀斑,经3轮蚀斑纯化,获得数株重组杆状病毒rBacHisH5HA。提取重组病毒DNA经PCR证明目的基因片段已插入杆状病毒基因组
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