禽流感病毒A／PFV／Restock／34（H7N1）HA基因在昆虫／杆状病毒系统中的表达

樽满秋华

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《中国预防兽医学报》
Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine 起止页码：294-297 2006年 28卷 3期
摘　要:经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/PFV／Restock／1／34（H7N1）1．7kbHA基因的cDNA，将其克隆到pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后，亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis，筛选到重组质粒命名为pBlueBacHisH7HA，测序正确后与线性化的杆状病毒DNA（Bac-N-Blue^TMDNA）共转染sf9昆虫细胞，挑取蓝色蚀斑，经三轮蚀斑纯化，获得数株重组杆状病毒rpBlueHisH7HA。提取重组病毒DNA，经PCR证明目的基因片段已插入到杆状病毒基因组中，血凝实验、SDS-PAGE和Western blot实验结果表明HA基因在重组杆状病毒感染的HFive细胞中获得了表达。[

李贺[1,2] 孟庆文[1] 冉多良[2] 于康震[1] 陈化兰[1] 李永强[1,2] 吴东来[1][1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 [2]新疆农业大学动物医学院,新疆乌鲁木齐830052