本帖转自:http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者:walkundersky7 b1 L( o- w7 D, ^( _4 K
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来,经过不断的开发和改进,现在已经广泛应用在诸多领域,是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
* E$ J" F" i0 a' ?0 g0 M 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer:A Laboratory Manual第二版的影印本,是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿,是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进,从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧,无所不至,令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
( }) `4 J7 m7 J$ V+ k 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇,可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考,既是实验室必备的工具书,也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
, Y& B" {" D: v# r5 Z' i& U# X% z
" T( a& U+ [9 i. V目录
! g. E/ p( Z+ U8 g5 I0 E( }第1篇 PCR导论5 r* z8 }& \' w3 g+ g
1 建立一个PCR实验室2 x3 ~! j: Z# G# }/ a
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
9 K4 U2 p: z0 d9 B4 ~, V3 高保真PCR酶
C/ }! I4 \( w& h ]4 PCR的最优化和常见问题解析
1 T" e! j5 d6 ?7 [8 ~5 富含GC片段的PCR扩增
d& B2 U4 y/ ?6 精确扩增大片段的技巧
" X1 t) Q1 g. [6 [( N4 ^; u7 PCR引物设计
& C! ]; S) x! U X" M" w: @4 {8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序7 ^. G' R8 c, n8 P0 d
第2篇 样品的制备( S+ i9 _8 [2 f8 Y
9 DNA的纯化( O, b j% a: x( Z4 `0 l
10 RNA的纯化) U- k# H* G' D
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达4 ]( ~& ?) A% O" k
12 克服PCR受抑制的策略
) P% N6 U6 K$ s- ~4 c第3篇 RT-PCR方法
* p4 {7 S% K, K& a- k13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
) ` ~. P- t" `6 ?& A14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler. W( J1 ?+ C1 P6 r- S4 i6 j
15 定量PCR的新技术" C% x7 _3 |. X! L& B" U
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
2 A% N+ A4 p% A$ }/ v# L& L第4篇 PCR产物的检测:专门应用% n) S( F9 K2 g0 m
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
9 o# z: X D& ^/ j! T2 l& U8 u# M18 单链构象多态性分析
3 z7 w, ^& k: P" {19 逆转录酶原位PCR8 Q" _0 O" l6 z3 E h' J
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
3 V7 u; q' G8 L* F# ~第5篇 用PCR分析基因的差异表达
$ g- D6 `0 W n% y3 {, f21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
" r( U$ R9 v2 w) u22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因0 w, ^$ B# M) e x1 b7 f
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
! X4 o1 `3 x% ^第6篇 用PCR进行克隆, j$ p! E* H) X& m; H$ |
24 以PCR为基础的文库筛选方法
/ J) W( o8 w; V" E b7 H25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进3 h- E) y- A* S
26 用PCR合成和分析DNA文库% U7 f* W, I4 o3 Z
第7篇 PCR产物的克隆
7 k( f7 q" Z+ q4 A+ N27 克隆PCR产物的策略
( s$ p0 D6 x7 B) _' n& t- b28 PCR产物双向和定向克隆
& n4 G, }+ x8 |/ M29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
1 X9 \1 ^6 S$ K4 |第8篇 利用PCR进行诱变; Y6 o% e# E# D1 u5 j- E
30 诱变PCR
* ^7 ^. F8 R) y6 e! ~* N8 v0 s7 h31 快速PCR定点突变8 V* y2 }$ \- g; A
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
& C3 ~0 R% l) Y6 [1 |33 流线型基因装配PCR0 o* v$ J* o" I1 R! u" W- J. R, z
附录1 专利
8 ~; g$ @8 W) F0 o' M附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
0 g& x1 B2 F' ?+ I5 x! o附录3 注意事项. K t6 ]0 a/ l1 C8 W! Z
附录4 供应商4 P2 n# c+ f& @9 L, n5 j5 H
索引
`& H8 g% `& A; o. q/ ~+ R; m8 ?* s0 I2 k3 D0 J2 Q# {$ Y
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