本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky; e" `3 W) I: k& v8 D
8 ^% `* e8 r! ]: c) \聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。/ K% S2 n* ~4 ?( v" b, ]
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
# ~) f( ^0 R" x: @$ d 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。1 s1 w. V% p2 k. a5 @+ J
7 [, m# `6 e6 s3 ~# F$ u( c
目录
* Y: t' p) U* @; | h3 u第1篇 PCR导论
: ]' L9 o2 y. U9 @5 o1 建立一个PCR实验室6 s0 V- G, [* j2 g1 M0 [+ k5 j- Y
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
8 D% u6 |3 `' r6 w' N0 a3 高保真PCR酶
. o8 L i* R4 Q6 I# o' F4 PCR的最优化和常见问题解析
) h3 d! g9 f' b! g d. q5 富含GC片段的PCR扩增
! \, _ H2 O$ t1 ^+ T6 精确扩增大片段的技巧1 ^/ f4 [- F& l6 W3 J S+ w: I1 k
7 PCR引物设计2 s n5 y# M. i; J( J7 C7 C5 A+ f
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
/ E4 M; B- R( f; x# `第2篇 样品的制备
R# u! p1 L/ J5 |3 I9 DNA的纯化
/ w8 s5 K& K: s L& Z/ [; V10 RNA的纯化
9 s/ T0 P( c' P. j1 a5 N# I11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达/ k7 N" r/ W7 e2 A1 t2 l
12 克服PCR受抑制的策略2 M: S: B/ r) N- |# Z. B) @8 o
第3篇 RT-PCR方法' o# B* X2 `4 T5 L
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用6 q1 w# x" y( j' M1 a) L
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
) O& [' b' K( R! b0 ]15 定量PCR的新技术
0 l/ x; Z. {+ Z% Y: f16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
2 V2 P3 Z; s+ }第4篇 PCR产物的检测:专门应用
6 \( U- o B% r: P) z/ X17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
; H3 n S: b( z18 单链构象多态性分析1 b7 [# | v! t, _) Z4 w
19 逆转录酶原位PCR: K4 z1 l/ B9 v/ e9 j
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法% B; _% x7 N2 ^0 A8 {9 K
第5篇 用PCR分析基因的差异表达: N2 j& H) M3 w; k& T/ D# \% J
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用% C9 L0 X0 a3 q
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
8 n ?4 e* K1 O. F+ j) l9 z; a23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
' G, S( t4 c i0 F1 [: y ~第6篇 用PCR进行克隆& } o6 ?4 r; J) L( K' c' a& `
24 以PCR为基础的文库筛选方法7 T' c0 i. ?9 N/ k. t* f
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进$ Q4 ]- U5 ?% Y# A L/ k9 L5 q
26 用PCR合成和分析DNA文库5 u* c! B7 i/ Q( k3 |
第7篇 PCR产物的克隆
) D& N+ g6 { ~& s) I27 克隆PCR产物的策略
0 r7 C b' J+ D8 ]' b! Q. [28 PCR产物双向和定向克隆) i) E# Y6 H" p9 {2 N3 q; P
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
( M2 @9 {; k% r) M第8篇 利用PCR进行诱变
' h8 s1 S! A9 J# Z. Q) P/ A$ D' u30 诱变PCR
( X. n e: e! Q1 i4 ?31 快速PCR定点突变* E* Z3 G2 j. Y+ D$ w3 i, b- y. \
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
: E4 B/ U+ U: K q5 j33 流线型基因装配PCR% X0 m1 K) z q
附录1 专利. ]8 B( |2 X2 Q2 a. F/ g
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
7 @0 {$ B" O& c) O/ L附录3 注意事项
8 Q$ Q! ^9 E' C" P T) g7 o附录4 供应商
8 o' f. N- |. a5 w) N索引
k1 y2 f) m5 n# ]- c% |0 D3 T7 z$ `9 n
+ F) C v$ P* k+ D6 G3 L6 k
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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