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PNAS:开发出一种更好的HIV唾液测试方法

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发表于 2018-1-29 20:15:32 | 显示全部楼层 |阅读模式
当涉及筛选人们是否感染上HIV时,公共卫生官员面临着一个艰难的选择:开展一种可靠的血液测试,以便能够较早地检测感染,但是很少有人会自愿使用,或者利用唾液开展一种方便的测试,但是在感染的初始阶段,这种测试是不那么可靠的。

在一项新的研究中,来自美国斯坦福大学、阿拉米达县公共卫生实验室和加州大学旧金山分校的研究人员开发出的一种新型测试方法可能会改变这一点。这种新型测试方法将在测试杯中吐口水的便利性与血液测试的可靠性结合在一起。相关研究结果于2018年1月22日在线发表在PNAS期刊上,论文标题为“Antibody detection by agglutination–PCR (ADAP) enables early diagnosis of HIV infection by oral fluid analysis”。


图片来自Juan Perilla。


斯坦福大学人文与科学学院教授、化学教授Carolyn Bertozzi说,“越早检测越好,这是因为HIV感染者能够感染其他人。一个人的行为不会基于他们的HIV状态而发生改变的每一天是他们可能感染其他人(尤其是年轻人)的一天。”

HIV检测简史

到目前为止,检测HIV感染的最常见的方法是在血液样本中寻找抗体,即免疫系统产生的的抵抗这种病毒和反击感染的蛋白。这种测试方法要比直接寻找这种病毒方便得多,这部分上是因为在感染的早期阶段,抗体在血液中相对较为丰富。

然而,它也存在有一个主要的缺点,特别是对于那些想要(有时需要)让很多人快速地接受测试以便遏制HIV扩散的公共卫生官员和研究人员来说:针头。

论文第一作者、Bertozzi实验室研究生Cheng-Ting Tsai说:“有很多人不愿意前去接受血液测试。但是如果利用口腔中的液体开展测试,那么突然间就会有新的人群愿意接受这样的测试,但是他们不愿意接受之前的血液测试。”

但口腔液体测试也有它的自身问题。虽然唾液中存在HIV抗体,但它们不会以在血液中的水平积累着,或者不会以同样的速度积累,这意味着没有多少抗体存在于唾液中,特别是在感染早期。 Bertozzi说,当口腔液体测试能够可靠地检测到HIV时,“你已等待了太长时间---在那个时候,这种感染可能会扩散。”

临床转化

在这项新的研究中,这些研究人员的工作就是如何更容易地检测HIV感染者唾液中存在的少量抗体。为此,他们采取一种间接的方法。他们并不去寻找这些抗体本身,而是寻找抗体能够做些什么。

这些研究人员利用了抗体的一个关键特征---它们有两个臂,每个臂都很容易地附着到诸如HIV之类的病毒上。他们获取部分HIV,将它们附着到一种DNA片段的一半或另一半上。随后,他们将这些经过修饰的HIV加入到唾液样本中。如果这种样本含有HIV抗体,那么它们的两个臂就会抓住这些经过修饰的HIV,将这种DNA片段的两个半部分连成一条连续的链。一旦产生这种完整的DNA片段,就可很容易地利用标准的实验室技术加以检测。这一切都能够不需要采集血液样本,也不需要利用太多的技术来处理采集的样本。

虽然这些研究人员说,还需要开展更多的研究来验证这些结果,但是首批实验表明,这种新的测试方法表现良好:它正确地诊断出22个参加阿拉米达县HIV筛查实验的人,这些人中的每个人在接受其他方法的测试时都已被[color=rgb(16, 78, 129) !important]诊断为HIV阳性。重要的是,这种测试方法并没有在另外22个HIV阴性参与者中错误地检测到HIV。

与其他的唾液测试方法相比,它也可能在更早阶段地进行检测,不过不早于现存的血液测试。在一组8例样本(当采用当前的标准唾液测试方法测试这些样本时,产生了复杂的测试结果)中,利用这种新的HIV测试可检测到6例样本呈阳性,其中的一例已利用血液测试证实过。虽然这些结果是初步的,但它们提示着这种新的检测方法具有更好的灵敏度,而且可能比其他的测试方法更早地检测到HIV感染。

Bertozzi说,“我们的希望是我们能够比当前的口腔液体测试更早地给出结果,这是因为它具有更好的灵敏度。”除了HIV之外,她和Tsai说,同样的测试原则也可能适用于过敏测试和针对伤寒和结核感染的筛查。Bertozzi说,这些研究人员也正在研究这种方法是否能够作为一种测试麻疹疫苗接种效果的方法。

(生物谷 Bioon.com)


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 楼主| 发表于 2018-1-29 20:17:10 | 显示全部楼层
Antibody detection by agglutination–PCR (ADAP) enables early diagnosis of HIV infection by oral fluid analysis

Cheng-ting Tsai, Peter V. Robinson, Felipe de Jesus Cortez, Maria L. B. Elma, David Seftel, Narges Pourmandi, Mark W. Pandori and Carolyn R. Bertozzi

Oral fluid (OF) is a highly effective substrate for population-based HIV screening efforts, as it is noninfectious and significantly easier to collect than blood. However, anti-HIV antibodies are found at far lower concentrations in OF compared with blood, leading to poor sensitivity and a longer period of time from infection to detection threshold. Thus, despite its inherent advantages in sample collection, OF is not widely used for population screening. Here we report the development of an HIV OF assay based on Antibody Detection by Agglutination–PCR (ADAP) technology. This assay is 1,000–10,000 times more analytically sensitive than clinical enzyme-linked immunoassays (EIAs), displaying both 100% clinical sensitivity and 100% specificity for detecting HIV antibodies within OF samples. We show that the enhanced analytical sensitivity enables this assay to correctly identify HIV-infected individuals otherwise missed by current OF assays. We envision that the attributes of this improved HIV OF assay can increase testing rates of at-risk individuals while enabling diagnosis and treatment at an earlier time point.

http://www.pnas.org/content/early/2018/01/12/1711004115

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发表于 2018-1-30 06:51:40 | 显示全部楼层

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发表于 2018-1-30 08:52:29 | 显示全部楼层
看起来不错的研究,要是有人能详细介绍下这个agglutination–PCR (ADAP)就更好了~
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