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[转移帖]HBV cccDNA 提取

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楼主
发表于 2015-9-2 15:49:43 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
原帖由szy3282 发表于 2012-7-17 15:35 :

大家好,我是新手,请多多指教!!
我想问一下一般HBV cccDNA是怎么提取的? 现在检测的报道不少,但提取的文献不多。有没有一个大家都公认的比较可靠的提取方法?我想先从HepG2.2.15开始,然后再做组织内提取。
谢谢了!
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 楼主| 发表于 2015-9-2 15:51:38 | 只看该作者
bigben发表于 2012-8-8 17:46:

HepG2.2.15、血清里面cccDNA都很少,里面大部分是RcDNA
提取的话看文献其实普通的提取基因组DNA的试剂盒就可以,然后再用绿豆核酸酶或者PSDA(不降解质粒的ATP依赖DNA酶)处理,只保留cccDNA

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 楼主| 发表于 2015-9-2 15:52:12 | 只看该作者
szy3282 发表于 2012-8-10 10:57 :

谢谢! 大概也就这个思路了。我想先做个类似CHIP的交联,把蛋白和DNA固定下来。不知道这个会不会影响后续的DNA提取和PSDA处理~~只能试试看了。
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