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[疫苗技术] [转移帖]用酶切法去处DNA的残留量

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发表于 2015-12-1 23:42:54 | 显示全部楼层 |阅读模式
原帖由论坛会员Jazz541发表于 2009-9-15 19:07 |

用酶切法去处DNA的残留量,但是酶的残留量在什么标准下是安全的呢?这个有疫苗先例么?杂蛋白的去除工艺有要求么?  

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 楼主| 发表于 2015-12-1 23:44:00 | 显示全部楼层
lianghuang1983 发表于 2009-9-16 08:21:

别的不清楚,赛诺菲巴斯德用benzonase非限制性核酸内切酶处理疫苗已有先例。  
http://www.freepatentsonline.com/EP0583142.html
Merck 生产甲肝疫苗,使用benzonase去除Vero host DNA,你可以参考一下  

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 楼主| 发表于 2015-12-1 23:44:56 | 显示全部楼层
pipi302 发表于 2009-9-16 19:31 |

To 楼上:
Merck的Benzonase检测试剂盒的检测灵敏度为0.2ng/ml,看到Merck的甲肝疫苗中Benzonase的含量为<0.0001ng/25U/0.5ml(剂量),这个是通过计算稀释成相应的25U/剂换算成的吧。Benzonase可以通过纯化手段去除,应该是残留量很低的,具体是多少还真没有看到过具体值,希望看到的朋友及时反馈啊!  

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 楼主| 发表于 2015-12-1 23:46:43 | 显示全部楼层
dudupan发表于 2009-9-27 16:22 |


benzonase确实是目前已经的到广泛应用的核酸酶,Merck在其HPV疫苗生产过程中也使用了该酶。该酶的试剂盒中配用benzonase残余检测试剂盒,可以对终产品中的benzonase含量进行检测。不过在国内,要把这个东西常规使用恐怕有点困难,太贵了。NOVAGEN_Benzonase.pdf (




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