找回密码
 立即注册

QQ登录

只需一步,快速开始

搜索
热搜: 活动 交友 discuz
查看: 14701|回复: 18

蛋白质纯化与鉴定实验指南

[复制链接]

826

回帖

2853

学分

3万

金币

管理员

积分
2853
发表于 2015-2-3 16:28:57 | 显示全部楼层 |阅读模式
本帖转自:http://biosky.haotui.com/thread-1273-1-1.html  作者:hantavirus
" {! U! D: I/ A- t3 A( T7 N& D: I' m! z
朱厚础 等译,1999年7月出版,ISBN 7-03-007186-7/Q.837,
- ?) |/ O. g7 [' V& I1 S% l6 x9 kStrategies for Protein Purification and Characterization:A Laboratory Course Manual,D.R.Marshak, J.T.Kadonaga, R.R.Burgess,M.W.Knuth,Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1996$ A$ |, y$ m9 a. O2 t- R6 l" M0 t

2 R5 P' Y2 ~. @' W4 b为适应生命科学发展的需要,自1989年以来,著名的美国冷泉港实验室每年举办一期“蛋白质纯化与鉴定研习班”,本书既是在其讲稿的基础上写成的。全书分4个单元,分别以钙调蛋白、转录因子AP-1、重组σ32和胰岛素受体为例,从不同的原材料出发,通过一组具有代表性的并经多年优化的纯化和鉴定实验,具体地介绍现代生物学和医学实验室中一系列常用的蛋白质纯化与鉴定技术;对每个实验均详细叙述其材料设备、试剂配置、操作程序和注意事项等。书后附录对若干重要的通用技术做了补充介绍。$ \6 A) r% U/ V! r
( \* R/ C" v9 w
目 录3 x7 _2 ]; L0 f, S8 F7 A
9 D, B  g# `% K
前言# r# l2 H1 Y( O6 M9 u
绪论 18 Y* z1 m/ R3 O
一、能用作纯化依据的蛋白质性质 19 Y3 H/ }7 i' i3 F
二、分子相互作用的类型及其影响因素 5* B* h7 u9 e1 j8 ~# |' L' B6 F
三、分离方法的类型 6
0 E4 M) C, L; b0 L+ t参考文献 71 k& s  u: X5 h! d
如何使用本指南 9
- I# |5 g) D4 l5 T" F0 V' z第1单元 钙调蛋白的纯化 Daniel R. Marshak 11
4 D" t: y5 b' b! m& a- W  g实验1 活性测定:钙调蛋白组分的活性测定 19
6 t. ^2 I; P7 U0 a' p" ?9 N实验2 组织提取物的制备 24
7 D$ f1 t, \; y实验3 粗分级分离 32  f; h5 a  ?5 g9 X2 j3 L  T
实验4 离子交换层析 39
7 N2 D& z% X# D  {  x& Z$ d实验5 疏水作用层析 46
2 G$ e+ x% k% j8 \" k% F" ]实验6 钙调蛋白的鉴定:收率的计算 51
' t& M" L, E$ Y  h实验7 钙调蛋白的鉴定:电泳 53
6 B; }* \9 C' n2 q& d、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 53. L5 C0 |; O0 r
二、无法垢剂的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 54
" v. g7 L6 Y8 ?- _' q三、尿素梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳与折叠分析 56
; T( `/ s* `8 t0 v" `7 [实验8 蛋白质的裂解消化 59
- r; A3 A/ W( D9 A  F4 i4 h2 e一、钙调蛋白的溴化氰裂解 63
4 G  B0 i" \) Y0 ^( ^2 b二、钙调蛋白的胰蛋白酶消化 64
6 J# ?0 g, H1 d$ R: E2 K2 I; H8 Z& a实验9 反相高效液相色谱 66/ @* i: E* g3 P: _# y
实验10 钙调蛋白的物理分析 70
( }5 m8 t+ g! K一、紫外吸收光谱 70. D* h! P9 o; o( P3 U4 b( z
二、蛋白质和肽的质谱 71
4 I! _  F2 T* f, |3 I2 Q9 m: u5 j4 g实验11 钙调蛋白的化学分析 751 \: ~' u/ r9 N$ Y5 @! X
一、氨基酸分析 75
7 h# _- _- x3 o2 D: W! I7 {2 W) Z( p二、序列分析 76( f2 Q3 ?4 P% o5 X" ?
试剂的配制 821 E6 N5 {' n+ n+ W
第2单元 Hela细胞转录因子AP-1的纯化 James T. Kadonaga 89
+ q: K+ ~" k4 P. F9 {4 J. S8 Y5 x实验1 Hela细胞核提取物的制备 91/ G" t4 i) ^: u
实验2 Sephacry S-300 HR凝胶过滤层析 94
# m$ A5 p+ R$ L( b5 l6 X
( Q! V. |9 y& ]/ {$ k0 x
! \3 f  l  z( D, H  Q, r, ~下载连接与解压密码: @hantavirus    请更新下载链接,谢谢。9 C  c; d/ _% h) M. |
游客,如果您要查看本帖隐藏内容请回复
3 b8 B, |' J$ A6 F) O# [% h5 J8 f4 G
0 \: f' ?7 a6 A2 z' f
, O3 `2 Z: v# G; y% C- Y& z' q+ t

本帖子中包含更多资源

您需要 登录 才可以下载或查看,没有账号?立即注册

×

641

回帖

621

学分

2077

金币

论坛区长

积分
621
发表于 2016-5-19 11:52:35 | 显示全部楼层
wwwkkk83 发表于 2015-2-3 16:28
0 X& a  d* \6 J2 j& U本帖转自:http://biosky.haotui.com/thread-1273-1-1.html  作者:hantavirus
+ b- M  {0 t1 L  G+ M
+ i  @; Y& r$ h& Z! ?8 ~( o. w朱厚础 等译, ...
% n: D0 \0 B9 f" F# N7 t
多谢分享1 q- h& X/ Y6 R5 r" @. w3 A5 @  U

9

回帖

2

学分

548

金币

病毒学院小学生

积分
2
发表于 2016-7-10 15:43:23 | 显示全部楼层
谢谢分享

11

回帖

7

学分

1954

金币

病毒学院小学生

积分
7
发表于 2016-8-11 16:54:04 | 显示全部楼层
谢谢分享

36

回帖

62

学分

6万

金币

病毒学院大学生

积分
62
发表于 2016-8-12 12:43:25 | 显示全部楼层
谢谢分享......

2

回帖

2

学分

4

金币

病毒学院小学生

积分
2
发表于 2016-8-17 15:07:46 | 显示全部楼层
感谢感谢

1320

回帖

1835

学分

10万

金币

管理员

积分
1835
QQ
发表于 2016-8-17 17:12:01 | 显示全部楼层
有些链接已失效了,后续应该更新或说明一下' J5 l$ _/ S7 D* Q  [9 ^9 M8 y- B4 j# P

138

回帖

19

学分

858

金币

版主

积分
19
发表于 2016-10-9 10:57:10 | 显示全部楼层
谢谢分享!

21

回帖

2

学分

182

金币

病毒学院小学生

积分
2
发表于 2016-10-11 23:00:57 | 显示全部楼层
谢谢分享+ ?6 G- [  |1 c" w/ W0 J

41

回帖

2

学分

63

金币

病毒学院小学生

积分
2
发表于 2017-5-27 22:36:24 | 显示全部楼层
xiexie

14

回帖

1

学分

145

金币

病毒学院小学生

积分
1
发表于 2017-7-14 17:05:52 | 显示全部楼层
谢谢分享, J- Z; o0 Q. z* t& _: c; r2 m8 Z

7

回帖

1

学分

240

金币

病毒学院小学生

积分
1
发表于 2017-7-19 16:18:44 | 显示全部楼层
many thanks

45

回帖

4

学分

174

金币

病毒学院小学生

积分
4
发表于 2017-7-26 23:13:45 | 显示全部楼层
谢谢楼主的分享,学习学习。

84

回帖

2

学分

489

金币

病毒学院小学生

积分
2
发表于 2017-8-5 11:15:25 | 显示全部楼层
感谢分享8 G& z4 w% _/ r% g

29

回帖

2

学分

46

金币

病毒学院小学生

积分
2
发表于 2017-11-28 15:15:35 | 显示全部楼层
谢谢分享

4

回帖

2

学分

116

金币

病毒学院小学生

积分
2
发表于 2021-7-28 08:31:11 | 显示全部楼层
好人一生平安

15

回帖

2

学分

368

金币

病毒学院小学生

积分
2
发表于 2021-8-4 12:57:35 | 显示全部楼层
感谢分享

15

回帖

2

学分

368

金币

病毒学院小学生

积分
2
发表于 2021-8-4 13:03:18 | 显示全部楼层
连接已经失效了 @楼主给更新一下吧

6

回帖

2

学分

9

金币

病毒学院小学生

积分
2
发表于 2023-8-30 11:51:11 | 显示全部楼层
谢谢分享% z, Q; _. M; P8 p
您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册

本版积分规则

QQ|Archiver|手机版|小黑屋|中国病毒学论坛 |网站地图

GMT+8, 2026-3-7 14:05 , Processed in 0.094712 second(s), 39 queries .

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2025 Discuz! Team.

快速回复 返回顶部 返回列表