本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
# ?, Z3 S( a' `& y# s* p, l 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。: v: B5 v6 W5 X- T
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。1 R2 A y0 @$ W' l. x
% O1 v+ j7 n% S. B" c目录
/ k: t& E9 N# U7 ] ?* D, D, P第1篇 PCR导论
# m3 O, |5 c# y+ O% t: G5 y1 建立一个PCR实验室
( L2 F) ]1 i0 p! y2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
t5 o1 S& q5 } }0 W3 高保真PCR酶7 \4 t( h) {" c$ k# U# X& w: l
4 PCR的最优化和常见问题解析' H( T" s2 a; Y4 T0 |2 I% H+ U e
5 富含GC片段的PCR扩增
' \* u- E& Z3 K2 n( b- f6 精确扩增大片段的技巧
, O) x2 S3 {+ @7 m1 }% j _7 PCR引物设计3 Z7 C9 x8 G$ K5 n6 {6 F, s( s
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序% `# V) [! O& k- g+ f
第2篇 样品的制备
0 D4 |3 E* @# ~7 d* Q7 J9 DNA的纯化
8 [, ~0 V" C7 X10 RNA的纯化" C' O4 s1 y& U1 M: m+ S; ?! g
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达3 ]. U9 l+ Z6 e( A
12 克服PCR受抑制的策略. n" d4 ?5 w) d1 }$ w
第3篇 RT-PCR方法3 w1 w& d; U8 j! p4 c- C+ o
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用/ p6 M0 N5 d- m) |
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
1 e1 f1 Q3 F% j+ e$ B15 定量PCR的新技术
' Z u k1 H/ l$ f16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增3 D1 X7 Z$ G/ a- t: S8 c
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
+ N$ ^" B: `$ R1 h, K17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法! w3 w- d% J' `6 _
18 单链构象多态性分析3 r+ v5 F1 K3 D0 A8 p, p! g
19 逆转录酶原位PCR/ T- N& x+ Z" T6 Y$ t2 S
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法, B5 }$ v/ O9 [/ u& B5 o5 z* Q: T/ o
第5篇 用PCR分析基因的差异表达& n) S+ S/ ~9 n% n
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
+ l1 p1 x) c! y R4 G22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因. e1 v* e8 j8 g0 d; G1 J" u; E
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
+ m1 J5 I5 ?, p! d9 g第6篇 用PCR进行克隆2 G" e3 a4 u2 Y: U( U2 U3 E1 z
24 以PCR为基础的文库筛选方法
, p% o- B( v0 \( s( K( t25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
b9 D# C8 g; s, g+ y8 O26 用PCR合成和分析DNA文库
* l9 M# g/ _1 p5 A1 m第7篇 PCR产物的克隆3 A6 {% {' \* a- f8 P1 x4 {
27 克隆PCR产物的策略
8 V: U2 c5 \8 a28 PCR产物双向和定向克隆
% r1 u( }3 u% }" ]: h) J* Y5 ]29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
- N4 Y4 v" P3 u: a# Y* Y( W第8篇 利用PCR进行诱变, @7 K, M) j& E" g
30 诱变PCR+ x- m( ^& o8 E, [6 N: C" K2 ?1 t$ a/ W
31 快速PCR定点突变5 B6 x) Q8 e- N3 E# g7 [- j8 ]+ l
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
; C3 `+ S* c' Z' {" F9 T7 ^5 C33 流线型基因装配PCR
' z# A# y$ o( l, y+ _9 g5 m附录1 专利
" @4 I& ?6 M3 z; m$ J/ F附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
/ ~' _/ {9 X+ q8 Q附录3 注意事项
2 z7 ]0 B9 x0 Z2 M0 H- n, y. v2 t附录4 供应商& e4 a1 b) ~8 l; O1 i8 s5 k
索引. Q) e! S9 `* B
9 f( j8 w$ [: }/ i$ Z, y5 i% \
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