本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky# y$ f& n) O* r* e: p) q( q
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
3 D" S2 ]. X0 E3 ^ 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
, N* V7 X, g" S% j" R8 z5 _3 b3 _ 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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0 `" r; z' T- ~2 Z( r目录- w; h N6 W% \" [
第1篇 PCR导论
1 m& @: t- @! y W+ c7 h1 建立一个PCR实验室9 E/ h0 m( ?& z! w3 ~0 K( A5 i6 G- S
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
, Y1 t! Q$ _& l; I3 高保真PCR酶
' [4 Y; S. q: e: y( @# t4 e4 PCR的最优化和常见问题解析
% a' S$ {$ ^% Q5 u& G6 w0 Y$ X0 j5 富含GC片段的PCR扩增% a8 f6 \- }4 O0 m
6 精确扩增大片段的技巧4 M; H8 Z) O" n+ ?$ K
7 PCR引物设计8 C" w% [7 j3 J7 A4 u: j+ j) W
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序% ~# i0 R' v$ _2 @1 R/ f
第2篇 样品的制备# U8 @& B' [9 O, s
9 DNA的纯化
) k; ?- _; z( Z& J! H- i1 J) q10 RNA的纯化
, f h( l5 v# U# e, r* [11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达! e2 e2 Q& ~! k0 v# y% O" j4 I$ Y
12 克服PCR受抑制的策略
- o5 A& i" {6 V. m; s! Q( d第3篇 RT-PCR方法
" f! g' `' Q0 K2 X) M+ U, V13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用& f) h' D0 J' S4 e9 y
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler! W* t; F0 p" \; ]& Z7 ~8 I0 M
15 定量PCR的新技术
1 r! c. F' k5 h% V5 R$ @, Z+ ^16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
! J. O4 l9 v( u第4篇 PCR产物的检测:专门应用
& | v" L; }* F; D5 z+ T4 x+ E3 F17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法) D8 c/ p F4 L( X
18 单链构象多态性分析
, p$ A1 N1 ?9 z8 L( M q0 x+ M19 逆转录酶原位PCR
2 T% s* s% p! L* F M2 N/ E$ b8 T20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
" V& I* f$ j$ c第5篇 用PCR分析基因的差异表达
8 ?% q2 |/ @9 K21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用, @) w F1 D1 ~
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因% q' s4 t2 S0 u6 v
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术% [. h% U) w# T/ i" G
第6篇 用PCR进行克隆5 {/ m4 N! G+ n7 `1 H" L4 d1 p8 |* q* M
24 以PCR为基础的文库筛选方法
% o/ m0 P4 T2 l25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进8 @9 l6 I& T9 j, i; i2 W
26 用PCR合成和分析DNA文库& h7 v! e0 E) M- M. b! _
第7篇 PCR产物的克隆
y9 a1 w4 \! R, `: \27 克隆PCR产物的策略
" ^0 g; D2 h. d5 d3 C7 w W3 \28 PCR产物双向和定向克隆. x: I7 g* N/ s6 i/ x6 Q
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建, w* _) A# x+ g/ q, l, H
第8篇 利用PCR进行诱变
) T7 ]5 d9 y% y30 诱变PCR( _: `9 u; t# m! q
31 快速PCR定点突变, F$ k" e5 s& T8 }
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因9 Y7 W: z" ?$ M1 _. N9 H
33 流线型基因装配PCR
2 f- g! t# [9 r1 [- ]2 ? V附录1 专利
) j8 K! F1 j+ w ]0 M附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
( c9 J; S9 h8 }, v附录3 注意事项
& r4 F0 g# Z+ |附录4 供应商0 D3 v7 @% x L$ u4 G: e4 R
索引
- h! b* ]; ]3 _3 i% E3 C- ?
, ]- t$ i+ y* ~5 Y, ~0 h# N
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