本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
! y! m8 K% `4 `# e 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。; V3 E6 @% z! e
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。, O9 a2 b+ C( H) H3 V
6 d+ i: g- X" `+ b目录
/ W5 }$ `/ A s' }第1篇 PCR导论. h2 U" K0 B' c, [+ E5 I4 g% M! U
1 建立一个PCR实验室5 L8 ~$ Q$ L4 l7 m L; w, v* H( H
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略, S2 r @1 c! q* i8 T: L: ?
3 高保真PCR酶! p% y" h& p2 O* u6 ^
4 PCR的最优化和常见问题解析
& f6 Y ~/ Z. c; J$ A# ~ p5 富含GC片段的PCR扩增" Q- Y. v2 s6 \8 g
6 精确扩增大片段的技巧/ c T# x' r5 |5 a6 I) C% h. \* ~% `
7 PCR引物设计
2 I9 P6 O5 h s/ a2 C. K1 u8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
- @5 z2 d# \3 O第2篇 样品的制备- r& W9 C4 m# T+ R
9 DNA的纯化
1 ]1 q* B8 ^! k7 }# C8 ?10 RNA的纯化
. X% Y. c% u. c11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
( ]' W) }. m3 i) Q9 r+ E+ K. w7 m+ f12 克服PCR受抑制的策略
' |. |- ?/ W& n- l" k4 x: P6 _第3篇 RT-PCR方法5 W0 v! _0 D$ g8 O, A% l3 y6 m
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用( Q; d! a9 y3 h9 Q3 B% Y
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler5 Q! F3 B( X: F0 }) S
15 定量PCR的新技术
. |+ Z/ `+ A6 `16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增8 Q1 e; R* B% W2 C9 P. E6 w" u
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
/ n- `2 w: f0 O1 ?! b, E6 t17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
- u2 s4 o7 h: m18 单链构象多态性分析. n) c$ L# I9 S ^$ K9 r. w
19 逆转录酶原位PCR
' I+ y3 z3 E+ ~6 D& S! o20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
# h( p8 ~: y9 d第5篇 用PCR分析基因的差异表达
5 ?# J Q6 r6 S- N2 x21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用+ l" f. u. m* ]; h4 Q
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因3 L& G& R3 Y$ z$ t5 S' k
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
/ p: U: c0 o7 m3 l$ n3 g第6篇 用PCR进行克隆. ~% P! N! C. @: j
24 以PCR为基础的文库筛选方法
K+ D# @+ e( H* }! ~& C' `25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
+ v/ ]% \* a2 d# @, E26 用PCR合成和分析DNA文库7 k) n1 @. e. J. y. G
第7篇 PCR产物的克隆1 R+ q1 h, E. p& i( X& a
27 克隆PCR产物的策略
) o3 p9 r' U' X! k* M28 PCR产物双向和定向克隆8 d. l% \/ Q# T
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建; T! X* _5 C$ c* ]) D `& q
第8篇 利用PCR进行诱变+ B" I V5 S$ u& `$ Y
30 诱变PCR
4 w5 x: q( B7 i. B6 ]31 快速PCR定点突变% @ D' s- J! w6 Q9 H
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因4 n' P4 G8 r3 V, i5 i7 R$ z3 q$ X
33 流线型基因装配PCR
! f9 a* {* W! b附录1 专利
. w7 ~! l5 V& T附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
4 z3 A# } e; p6 k' e- @附录3 注意事项
$ T. b. j$ B+ y5 P% \附录4 供应商
; X# T" Q, Q4 x2 F; Z索引; |. I8 y0 f" ]) I/ f% U0 J
) g: H: b! ]* |, X
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