本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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7 O8 M& Y( I$ O; e% z) Y/ W. e$ l聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。- u1 v5 W0 L/ ]* e
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
Y! L7 F" Q2 X3 E: w5 h- y 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。9 y# u! c( T" f h
, b; ^- S h) g4 @目录! P7 m' ^( O% H2 F9 K+ l. U2 m; X
第1篇 PCR导论
- G* T* Y9 M! h c4 v ]2 h1 建立一个PCR实验室
* J Z1 u3 ?$ [/ A+ L# B* m; j2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
6 ^1 b# C+ ^: F, G7 r( c. b, A8 j3 高保真PCR酶
: s) G# C6 r& M- }4 PCR的最优化和常见问题解析. {7 k+ r S, O C) v7 e
5 富含GC片段的PCR扩增* k# Q& i- s+ Y, t
6 精确扩增大片段的技巧" e ?( ~7 |& h( M
7 PCR引物设计, B' ^: d5 Q' M0 x- f
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
3 M' a6 N+ v2 [5 X0 x. t第2篇 样品的制备
( B- U" g4 f' l* f& O) L+ D9 DNA的纯化2 }) K/ a- p$ f; Z1 Z/ W% S4 T" J
10 RNA的纯化% h6 A8 \* e& k7 u1 E( x1 B
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达 S a$ D* Q' U- x- j3 F
12 克服PCR受抑制的策略
) {4 w: Y$ l( ^8 u- a第3篇 RT-PCR方法
% b1 x' c' @6 u, N7 s/ F13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用+ K" U3 w2 K! x. j7 G/ v0 @$ k
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler3 B- d% N* e W- q
15 定量PCR的新技术
" H) R, I" f7 j16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
% V# ?" G1 m9 f' e* q5 N; ^第4篇 PCR产物的检测:专门应用# e$ y) X+ ]1 ~) S9 e2 {
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
# H( t8 ^: C: z; x: a1 R18 单链构象多态性分析1 {" s: z7 Y# f: O5 H, i
19 逆转录酶原位PCR3 ~* [, ]8 v* `; O" v- e
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法: Y% \6 H) ~' w
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
! B, i' D- N. c* @" e2 R21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用6 P/ `* q, i1 n' n
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
1 g& _" h* K! n& T8 _7 R23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术+ I" R; Z3 ?% b3 q8 d
第6篇 用PCR进行克隆" I5 k4 X) j) ] G' A# E7 C
24 以PCR为基础的文库筛选方法
9 ^# o( ?! q4 ]25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
8 b ?; _6 T) N( \9 W5 A5 U26 用PCR合成和分析DNA文库* i% Y2 H" x2 R' ]" o0 H
第7篇 PCR产物的克隆
+ @- ?4 q6 R t; K) T27 克隆PCR产物的策略5 V8 X8 ^9 R4 ~3 N b% s
28 PCR产物双向和定向克隆- a: p9 z0 S, B5 B/ g( ]. s
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
# N l* C! Z/ R: b% Q# I第8篇 利用PCR进行诱变
. D: E2 X$ h' a30 诱变PCR+ o3 `6 O9 Q/ m0 S) j8 d
31 快速PCR定点突变8 ]7 l& s$ j# I# S' ]: u
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因; D; H+ X1 ~5 I7 F9 _3 \1 u
33 流线型基因装配PCR
9 d5 }8 Q P; x附录1 专利" t" O; t2 f& d# C; o
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
. U! I' H- u& G附录3 注意事项
$ P2 m5 q8 Z* P$ {5 A& t附录4 供应商
$ v- y0 {( `5 X& l, g ^9 r索引
6 ?4 s5 m8 v6 H* O' k$ Q* a7 t4 ^* n* X/ p
2 O D1 e: Q/ A4 f) R8 H" f. [
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