本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
0 l- T2 P3 Y1 n* J$ ]0 S4 f 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。7 |- z S3 E$ w+ j
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录
+ q' i+ ?2 b7 @) {) u' z第1篇 PCR导论& R8 f! r- G' q
1 建立一个PCR实验室9 r5 X5 B4 |, z( t7 U5 a6 q
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
. s5 ?; _8 w3 X3 高保真PCR酶
: w4 X) ? ?4 ^8 n" h. Q4 PCR的最优化和常见问题解析
# M. M6 W8 X. K. P2 h5 富含GC片段的PCR扩增; V+ e5 D- J/ L" K
6 精确扩增大片段的技巧& g# ]+ R. @" _7 S% R
7 PCR引物设计1 _4 Q# b& J8 {2 }; v% u
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
2 B" i, s5 x0 E: E. E X. |第2篇 样品的制备
" _: U% {5 o; y# Y$ j9 DNA的纯化
1 N* ~. @- e5 B' J: U1 n10 RNA的纯化
4 i- k: N( f8 P- ?% t+ {) i11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
+ ^; s! @& G u8 H! H7 z* ?12 克服PCR受抑制的策略
4 T5 W9 v V: `1 Q, L第3篇 RT-PCR方法4 D" j7 m. ^/ e. p6 I
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
$ F* L; v7 ~" ^8 P: M7 o6 _% X14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler; e F0 v u; k2 p" L7 o/ i" }" ]
15 定量PCR的新技术7 m. h: I" E2 h# ?% X! Z
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增8 H) E2 j! K# B; `) F& i9 l
第4篇 PCR产物的检测:专门应用" _& b# j2 Y9 q7 O8 e, h3 k
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法& @0 X$ K2 O6 N- `% D2 P5 b
18 单链构象多态性分析; X0 n V5 p& L! c# e9 V9 X6 A
19 逆转录酶原位PCR
, e, P' f0 R0 ~0 S* S% i20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法+ W- ~% ?3 x$ E) L& T5 l8 m% R
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
! j# c2 E- X+ r9 t+ d21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
/ u5 K) R5 Q; @+ U22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因' v' G) X: ] D4 Y
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术2 U ?; G/ @: t `3 w
第6篇 用PCR进行克隆4 N3 Z8 N/ m# S1 M* K4 q& `' ]/ F& W; r
24 以PCR为基础的文库筛选方法 V( J' t# r$ W+ S
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
/ ?5 P T. L7 a, ^; ], t26 用PCR合成和分析DNA文库
1 ]9 [9 k( b K第7篇 PCR产物的克隆
2 Q# t% a% l( X- O3 i27 克隆PCR产物的策略
3 a+ N/ B, d. M# m u0 j28 PCR产物双向和定向克隆* o4 Z3 _+ l6 l6 R# W
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建9 R- P6 g3 a O2 m
第8篇 利用PCR进行诱变, a4 M: n- Y7 d) m X- M: E
30 诱变PCR" j& ]1 T O: R- v- |+ Z
31 快速PCR定点突变
5 H2 g0 a& ^% Q32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
3 f3 j- |$ k3 K$ P3 r- f33 流线型基因装配PCR' T: ?* D7 y+ V. T& x4 d% T
附录1 专利
) z" Q4 v" m% C2 ~# F附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
4 T( ~0 x1 ?4 f$ l0 n( f" i附录3 注意事项
s+ Y5 M2 G1 E( }$ ^: z8 b附录4 供应商$ w) r6 B. y' A, T1 z
索引7 h9 @5 _2 a& e* G. a% _ T: [
2 z! w+ W7 L8 t4 I4 b4 A
1 Y8 Z: T2 l" y* g* C
下载地址：8 e# w& J! S' q5 I# z
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