本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky1 e/ Z$ {5 L! n3 Z3 F5 M
r( q, u: K% x: c* D聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。$ O5 u* e7 _; d& p1 W# V
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
; @& c4 u2 k6 s 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录+ G+ Y% s& R u: \8 {6 L8 v
第1篇 PCR导论
; E& I- X/ l2 L& V1 建立一个PCR实验室' ]5 C$ ]! j# U `/ W& ~
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
3 M, V" r: H7 s3 高保真PCR酶
; [) v9 E& P/ }, s1 y3 @. U4 PCR的最优化和常见问题解析
% B! q. z/ ?( L' k* v% D5 富含GC片段的PCR扩增
1 C# O3 U6 y' j$ f8 [! n- X+ r6 精确扩增大片段的技巧1 r0 Y3 q8 z' ]3 s: {$ P
7 PCR引物设计1 n& _( q8 m$ S7 {( n/ m
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序5 \7 G* p( K% ?
第2篇 样品的制备
8 E. W- f% \4 A; T& i8 t4 ?( q* x9 DNA的纯化& Z$ L: b) q* r7 X Y; F/ C
10 RNA的纯化
7 T7 ^! ] k* F. X, Z8 C11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达! n6 N. ~' A7 s- F" q- e' d! m
12 克服PCR受抑制的策略$ i; q; l8 [1 T9 }( ~8 @
第3篇 RT-PCR方法
8 {6 S( V( k6 b2 K# V13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用; Z0 S; m8 p, I
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler' g: L8 O* [0 T; r6 b+ ]& U
15 定量PCR的新技术* e |1 _8 G5 T! n6 _( I5 |
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
- D' x Q: O8 g# l! V4 s% g第4篇 PCR产物的检测:专门应用
' ^0 T8 i. V0 J; F7 p! o17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
: M: B) U# L/ ?8 e18 单链构象多态性分析
4 L% H4 ^" P" p3 ?19 逆转录酶原位PCR0 _5 U, i/ v, x. [
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
+ y9 W; _0 F$ K1 J第5篇 用PCR分析基因的差异表达
, u4 V3 s! d5 J2 b3 U7 Z21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
8 l& D0 y, K. c22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因$ Y2 q2 K* z2 u( _
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
( l5 |9 A L: I$ E% x第6篇 用PCR进行克隆7 Y( d1 k6 Z4 O' }. W% V6 z8 F$ t
24 以PCR为基础的文库筛选方法
$ d* \8 T2 b6 k; A7 c1 }8 t* `25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
# E* @1 ?' f! U* ?- _* [26 用PCR合成和分析DNA文库* Z* s* T- r* R) y
第7篇 PCR产物的克隆8 k2 i g. z1 y$ b2 y( D/ B0 c
27 克隆PCR产物的策略
: K) g: u1 w- {5 H, C28 PCR产物双向和定向克隆
6 |! z( e+ A- u9 l/ u; U29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
9 Y& b& H$ r, s3 ]6 q第8篇 利用PCR进行诱变" Z& Z* P5 u# v- z
30 诱变PCR h# R$ ^+ m8 @7 l: A
31 快速PCR定点突变
( G% y3 u% p( \3 e& I$ a/ `8 `: e32 利用PCR来突变和合成新的重组基因7 L9 c: G6 r$ D. m" O5 l
33 流线型基因装配PCR
. |- I# @6 o2 ]* V1 ?附录1 专利
0 W2 U T* t) I" w) A* M; m附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰) N. h! A; C! j# i) m7 B
附录3 注意事项
) p- c: X) u+ w( x z附录4 供应商- o, l5 l8 ?) J7 ^/ r2 x
索引* F: P, m) G$ o" K
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