本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky; v5 g2 w( Z7 p4 T; ^8 o
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
2 R5 U$ u6 W: h. C1 ~6 `+ I 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
; ]* Q" C' D+ c+ m3 E, Z 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。8 a8 L* p; y2 S" a0 q
+ y8 Z2 N% H) s+ I) a目录7 V) Z G6 h0 b9 V1 N
第1篇 PCR导论0 |3 e- M9 f! l- n
1 建立一个PCR实验室; {' D0 [ U. t+ z5 G
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略% J/ U, s' e6 B) p q. ~! E3 R
3 高保真PCR酶7 A* \7 M g4 T/ t
4 PCR的最优化和常见问题解析, g' g' D2 @% t8 C
5 富含GC片段的PCR扩增
" f5 `2 K: b0 K: c6 精确扩增大片段的技巧1 K" j% O$ D7 C2 |* h: n3 ]2 @
7 PCR引物设计& z2 O/ t5 j& |% S
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序' b, |- v% I1 H4 ~1 J$ ?
第2篇 样品的制备, ~; f4 l+ c& j1 a6 y
9 DNA的纯化+ [) X$ g9 i4 v0 V, b8 b+ ~
10 RNA的纯化
! K! u/ j/ ?* h$ n4 z11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
3 H' i6 j8 F% l) B8 Z* M+ U12 克服PCR受抑制的策略
( \' f. R6 R0 d+ P( E9 e. @/ x第3篇 RT-PCR方法
8 O) s2 [3 a4 O! V! E; H. v13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用! v7 I7 @ }" T+ {
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler& T6 d! d. S$ p# O
15 定量PCR的新技术# [9 l+ B, ~* o; H2 R9 X
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增0 \! O5 ]1 ~' K( @2 u2 w. e
第4篇 PCR产物的检测:专门应用1 X/ o ?+ a. E
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
9 Y2 ]8 M- L% U! q' T18 单链构象多态性分析
. t2 b$ C+ s9 U% P8 ~) z" s19 逆转录酶原位PCR
7 {$ {6 n) x; ^" G. ?" K20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法! z% z; F E Z% _5 Q
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
& m, p! T8 A9 S$ Q5 c7 n4 E- _21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用2 T; b# ?9 {6 X( b
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因; I$ b5 f& y7 M; G! L
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
. _8 p3 _6 w4 }% J第6篇 用PCR进行克隆3 m; A F0 c6 N+ L# w6 ^% o
24 以PCR为基础的文库筛选方法5 t: ^" R3 E( ~3 \
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进! m3 R6 P' |+ f
26 用PCR合成和分析DNA文库, _9 s. }0 D4 h
第7篇 PCR产物的克隆
* J: I( t! @; C2 t1 d, E27 克隆PCR产物的策略4 ?; g7 U& j5 W# ]7 X6 k1 \
28 PCR产物双向和定向克隆
, V: ?: R2 {: ~29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
% u+ P) T! [# \3 P) k第8篇 利用PCR进行诱变
' y, g9 I. X% D" a1 k6 G9 N30 诱变PCR% i2 p0 W, T) {- e6 V5 k3 `( A
31 快速PCR定点突变$ A8 l( E1 p: s- N+ T
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
$ R. W0 v6 v, ?8 t7 \2 {# y1 N33 流线型基因装配PCR4 |. H& w1 I8 \# ^5 a6 @5 j; r
附录1 专利4 e5 l$ w: O( H! K6 I3 P4 m* q* d
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
( M. Z5 a! [+ R附录3 注意事项
2 P( G1 v* f) G: D$ f6 R附录4 供应商
0 a: ]4 ?* c, N索引# p4 W, O$ p. N! Q# k
( Y: g) T5 i% g* B W; ~5 C0 n( H2 k5 [! I/ G0 ?# u+ j: B$ D3 k
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