本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky. d* B' f* A3 A$ ~; Z/ R. d7 ~9 c
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
, _6 z; r2 g, Q% N d% { 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。/ W0 A/ V1 @0 d/ Q2 v# Y0 L {
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录8 T1 h* C0 k* Z0 P4 Y9 ]: ]4 o4 D
第1篇 PCR导论4 r& _, {( H: F- E1 @
1 建立一个PCR实验室5 \$ p Z$ J$ ^+ y0 R' f# l
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略* M3 K5 L* J( u7 {! _ B q2 Q6 ~+ B
3 高保真PCR酶
8 O2 G5 G `) k5 ^. V A: n4 PCR的最优化和常见问题解析
7 `$ x" m0 K$ z9 w5 {* v5 富含GC片段的PCR扩增4 P! ^8 q; K0 i2 [7 i
6 精确扩增大片段的技巧
0 a: h$ t7 _4 ?2 p7 U2 X8 e1 M7 PCR引物设计
) i# ]0 K' ~ n! B/ n, o. m) K8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序 Y5 Q9 b. s3 n' v5 i1 G: y
第2篇 样品的制备+ @* `2 O- a& b: B! ], i! K$ p* ]
9 DNA的纯化' o1 o) u& F. B2 |. h
10 RNA的纯化9 X5 O5 s8 {6 U4 [& D8 X- x( A: ?
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达3 c6 M; U8 v" }6 D* Y- C) L
12 克服PCR受抑制的策略4 y. z$ ^& }* G% Z# c
第3篇 RT-PCR方法
) j6 W4 `! z0 z, C9 h% V" D h9 Y' v2 {13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
; j0 }/ P9 ?3 {, J; J: y# C14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
4 w! n2 z" {9 {6 B15 定量PCR的新技术
- V) J0 U- [, N16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
$ g% u! C7 \- m9 f3 d- W第4篇 PCR产物的检测:专门应用% v9 q0 L. Q' F1 T4 z6 u8 P
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法% a6 C/ b6 }! {. J; [# W5 f) ]
18 单链构象多态性分析
3 O7 M; Q( Y$ Y% q19 逆转录酶原位PCR
+ A) v8 c; c) }: b1 J5 U8 `0 v: i8 y20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法. h! N9 G% d8 L2 [/ R% X
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
. X$ V) ~+ i9 z) \* H& _# G' ~21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用" d2 U, Z- f2 n$ u" f% p5 O
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因9 ~6 T, `/ B: E! H- M0 z7 C9 v
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
# ?7 n5 q2 R* H8 k' E第6篇 用PCR进行克隆# w% D m- ~+ ]. c0 l
24 以PCR为基础的文库筛选方法
" \9 p% J' v0 D) F+ `: M25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进& g& n f6 c( r; r; i+ l& L# u
26 用PCR合成和分析DNA文库3 Z' \2 a+ i5 |5 T7 P& s0 S, M
第7篇 PCR产物的克隆
# J6 b/ i/ v: L1 ~0 n27 克隆PCR产物的策略
! o6 O5 s7 x- {& X$ v( N7 O, U7 H28 PCR产物双向和定向克隆
% K0 z5 n5 G1 b/ A) p2 p29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建% m& G' _" L. g( j! I! c3 E
第8篇 利用PCR进行诱变
7 x/ P1 h+ C+ r' z& C+ y5 h30 诱变PCR
/ z( A* ]: e- a31 快速PCR定点突变/ ^* G$ @( U7 p( X
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因+ ?7 s7 D: u# X8 H& H, n3 U
33 流线型基因装配PCR
, S& U/ g8 j* Z' n. j C* K附录1 专利" B- R2 p. Z% n9 y- o# M' g5 H0 j
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
) V4 Q5 I8 a# T) i, |附录3 注意事项' N# X" U' T2 A4 J8 F; S- `
附录4 供应商/ I! n. }& W; d! w
索引3 O2 v2 A, b1 |/ M
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