本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky1 n1 z2 t: F& {! g. Y$ J
- M" X5 m4 U/ g5 q) x聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。* |1 r' k! y9 i J, K, y
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。# V3 D+ b, ?8 L
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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$ s6 Y0 a5 z5 M w! \目录: i( o0 m. C. H: ~
第1篇 PCR导论
9 p0 W6 ?& J: U$ \: q" S1 i1 建立一个PCR实验室
6 E: p* ^8 T& Z |. ?9 ]2 x2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
' p) k* G q6 z6 K3 高保真PCR酶
! D; F. m" C- W. T |4 PCR的最优化和常见问题解析
4 o& X! n! H0 m$ _# q- }/ X6 L5 富含GC片段的PCR扩增
1 J9 K W4 @* c4 V1 G% N2 j6 精确扩增大片段的技巧% l. I j+ |( H8 g' P
7 PCR引物设计
2 o0 n. J' k' x9 d8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
; Y9 K( D" R; W% y# s+ h第2篇 样品的制备* j: X/ T3 S# y* y- L
9 DNA的纯化
2 ]) y/ l+ @3 h" _8 ~, f10 RNA的纯化
1 c r+ s1 h* |# o8 I4 g2 a11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
+ P/ X5 c% I' N7 y, [5 C/ B3 p12 克服PCR受抑制的策略2 r2 X( c/ Q3 p5 u3 S+ u' ^- L. @
第3篇 RT-PCR方法
8 l( n4 |7 I! J. X) O" c13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用" Y5 q9 y4 x( G2 d( L
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler: C0 r2 S# o! N
15 定量PCR的新技术3 g9 M7 u1 e5 i
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
! e0 U t# ~' c: Y第4篇 PCR产物的检测:专门应用
: } u2 p& l5 P* b( V2 @ M17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法0 `' S, l) c* a4 c
18 单链构象多态性分析/ i$ L- K3 t9 o
19 逆转录酶原位PCR
+ S( o& C6 p" K' w! D5 C l20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
$ {% R* m1 n) J& p3 ?1 Q N第5篇 用PCR分析基因的差异表达
/ P u q, T0 }$ [6 {& c1 j21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
_; ?1 A4 F# r5 F. {4 g1 o22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因+ }9 p# i6 M+ Z. }9 _# ~8 Z
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
7 k7 @. j" `6 M+ e, a- L# D F2 \第6篇 用PCR进行克隆
* Z, a [0 c* d& ^* J4 G# H, o24 以PCR为基础的文库筛选方法, X' U4 d% M- N$ M6 w6 D) @
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进' M) O/ j0 y0 t5 k
26 用PCR合成和分析DNA文库
& M/ E/ A+ h0 I( d# c第7篇 PCR产物的克隆
2 {! {! a6 u% P0 u# z$ O5 V3 U! E# q27 克隆PCR产物的策略$ m0 a; b" p+ K, M' e4 C" g
28 PCR产物双向和定向克隆! ~' W" @, i. P2 }
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
/ L: d3 p5 f# t2 w, B第8篇 利用PCR进行诱变
`1 i( O2 R0 S5 b30 诱变PCR* D4 c2 z) d3 L8 g
31 快速PCR定点突变
. o6 V p1 e9 k3 M3 Z7 }; k( p4 {; ?32 利用PCR来突变和合成新的重组基因6 ] [% l6 Z# ?4 V( {- u
33 流线型基因装配PCR4 J" B- ]/ v& p& a' V
附录1 专利
: z3 `, g/ e- N4 i5 R [附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
, X' B% [; P$ S( {: E# c附录3 注意事项: ~! T7 o4 U$ R* t
附录4 供应商+ V. b" C K! k4 M+ @
索引
, \' m5 K G) K7 S; T" w3 M* `- ^ v6 |( d2 ~; O- S% {5 E5 D
" X6 ~) ~; }4 \0 J9 x7 h: d. a
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