本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
4 ^* y7 j# j* r- t+ K# q2 W 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。4 J- _/ c, ^+ ^6 P$ i6 {8 t
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录8 d* p7 W& h& z- T0 @
第1篇 PCR导论8 ?; {3 E0 ?1 y/ g1 {
1 建立一个PCR实验室
- C) V6 ]; u$ E7 F- i- O2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
& ^: R" m; W8 H. x2 O3 f3 高保真PCR酶
+ \$ J9 x. T8 j, x {4 PCR的最优化和常见问题解析+ X% w3 Y1 Q3 p+ `- E
5 富含GC片段的PCR扩增
p9 M A7 C5 }/ v6 精确扩增大片段的技巧
0 u* Y' x' M' V1 h4 ~7 PCR引物设计
" ~5 g' | i6 C7 E m8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序- `1 t$ Y( D2 b) G+ n, x
第2篇 样品的制备
, j3 ^' h$ R1 B' P' |9 DNA的纯化6 K: L1 W7 @, U5 k5 ^* i
10 RNA的纯化5 W4 B, D( J: h }
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达1 f- b: O- F4 |$ r) v8 f
12 克服PCR受抑制的策略
1 c8 h+ M; X7 j) |第3篇 RT-PCR方法& P8 c- x3 |5 F
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用 i8 G; L; T. a8 T# A
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler" J$ |8 k3 R7 W4 G7 e
15 定量PCR的新技术
: z) [2 c4 g: S% K16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增' H! P% O0 F9 i F1 I7 F E
第4篇 PCR产物的检测:专门应用8 h3 G+ Y0 Y+ v! p) x' C- U+ V% `, L
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法" o! x" p* g" \9 N4 L6 p+ B7 j
18 单链构象多态性分析" y$ a, n# b8 t; z* g6 r
19 逆转录酶原位PCR; s, J; {1 g; ~. r
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法. M0 a" J3 C, r- M" `0 w
第5篇 用PCR分析基因的差异表达' n9 D( p' e% D3 a: `* \ G5 s
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
1 `' A8 N/ H o4 B7 q+ v1 x. X L22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
; j9 e: V" `/ h23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
, ^+ T* Y y/ g8 O% V- q第6篇 用PCR进行克隆( N- l Y" K3 @' p. K3 s6 ~
24 以PCR为基础的文库筛选方法
9 a8 R. w. V+ |; a* F# g" e/ r+ Q25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
+ E/ V; j y2 r) b8 L2 \ }/ N# n- X26 用PCR合成和分析DNA文库5 u) y0 X" f5 I/ t
第7篇 PCR产物的克隆+ s- m& Y. Q8 D" `
27 克隆PCR产物的策略
: Q) A& H& I& @( b4 ^- A28 PCR产物双向和定向克隆
% Q9 ^2 p5 C8 D) N6 y. X29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建( R$ w2 ?, T1 E: P1 [
第8篇 利用PCR进行诱变
: {7 e. G! `# \9 t30 诱变PCR& T! s/ d1 e7 M9 @( f! I
31 快速PCR定点突变5 B0 I+ D' |5 r
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
1 ~4 f4 O9 N% ^, |3 t0 L33 流线型基因装配PCR" {/ E h/ U5 J9 k/ p$ t# c
附录1 专利
9 N4 x g( q% ?, Q/ V附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
" H# H& h; s( r8 U7 A- O0 q/ A附录3 注意事项( A: @; H# D' J, \7 z
附录4 供应商* m4 ?9 e1 P: ]/ ]
索引9 x0 D4 O& C- J$ j b+ t5 R: k
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