本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky& T) x8 P+ A& I7 {
& Q/ ?; y l6 G* A7 h3 _+ M' v3 I聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
9 p9 h: z1 \. p& W5 A, H( Z 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
6 m% c6 ~# y7 ^+ f- g* x 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。5 i8 R6 X- ^- c6 o2 Y. A
$ d; J" Y; r# T( h0 |. X目录/ \# i- F4 o. R! m% R' h
第1篇 PCR导论
. h* q* x! P/ o8 E2 G1 建立一个PCR实验室( `7 A. k. W: @2 W! K$ b4 G
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略' M3 y% a/ d9 B1 o
3 高保真PCR酶/ o9 _! i& b$ y6 x8 s
4 PCR的最优化和常见问题解析# y, {: u2 A5 X }+ T# s6 m
5 富含GC片段的PCR扩增# O P6 Q4 X& h$ W- F1 c
6 精确扩增大片段的技巧
& L- j! R2 U# H$ U, v0 r7 PCR引物设计
' [# M! b0 H5 q2 N M8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序" x- T n0 V. j/ G$ p
第2篇 样品的制备$ l) P& Q: \3 ^' M! l. r5 g1 f: W: F
9 DNA的纯化, Z. _1 W$ k* D
10 RNA的纯化
2 _3 [1 x9 R7 e+ `11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
" ~8 y* V! N! H' V7 }12 克服PCR受抑制的策略, ^2 D3 {# [- T l
第3篇 RT-PCR方法
2 p* B! Q4 [; E( a8 ~9 E/ S5 X! {13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
2 C/ i& `# f! `) K* ]8 k) f14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler$ r0 K% D; J4 R7 ]0 ~0 o
15 定量PCR的新技术# Y1 b" r! p$ ?& j; Q
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增* z: x6 L5 _- u
第4篇 PCR产物的检测:专门应用" q) E* Q! N3 D1 q& z7 }
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
# e+ S" d' Q: a18 单链构象多态性分析& O0 r% b: d9 C1 J
19 逆转录酶原位PCR
5 R$ J) ~& N. Q% [20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
8 X ~% f5 u& H% H7 J6 t第5篇 用PCR分析基因的差异表达* h2 a, m; W$ A" L
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
6 b" }3 R$ d. L* F7 J5 C4 O22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
; c7 y4 _" K0 O/ ?% H; h$ U23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
) l6 x; R' \7 J: m1 ~# b第6篇 用PCR进行克隆: Q2 M1 {: n/ c% P3 D5 Y
24 以PCR为基础的文库筛选方法
- s3 v! ~: _) o( R7 t" I& m25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进0 x. ]0 Y$ g: s
26 用PCR合成和分析DNA文库
7 Y' V$ s$ j4 `) r. Q1 ^) j第7篇 PCR产物的克隆
4 r4 T$ H2 G2 c3 V4 k: A27 克隆PCR产物的策略
4 g* H0 C! R7 k' K28 PCR产物双向和定向克隆2 {9 d3 W5 ~8 i! \+ t1 S
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建6 m7 D. k; l' f/ d1 l
第8篇 利用PCR进行诱变
: Y. g5 i" B. N6 ^6 t30 诱变PCR; s! i1 i& ~, x# p a, c. m/ h* E
31 快速PCR定点突变" A. V) R; S5 t5 D! C* [1 P7 t
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
, N: z6 _0 p# W8 h1 u& m6 z33 流线型基因装配PCR
4 w* w6 @" ^# p' D. S; [7 s附录1 专利/ q5 Z4 @- ~( U3 u+ H; d- `
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰. h. Y/ f- m. q. M6 {7 z+ c
附录3 注意事项/ Y5 n; q: F+ R' \8 Z; d+ H! y
附录4 供应商5 }/ [2 `( ]6 X; g H4 A( X( Y
索引+ J' W. u' M2 Z6 m' X- }7 A
. j' ~& T& [6 P& H( v3 {" z. N" J8 ]0 X
下载地址：3 P& ?% m; I0 o* _8 r& X
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