本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
2 i( {7 e G) Z$ S) W$ F. d 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
1 Z- h# @& ~2 ?! E7 E, C 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。+ Y: u9 f% T! _/ T6 x% Q0 ]' Z
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目录3 S6 G) M( c5 V% |4 _/ [: v- v
第1篇 PCR导论8 m* `" D! J. u- |
1 建立一个PCR实验室
9 \ j8 {: z0 q# I2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略: Y- Y' C+ G: E) a
3 高保真PCR酶
, Q& |/ [& w) g# z1 V, p6 `3 ?4 PCR的最优化和常见问题解析 d( f: u6 s8 ^' H
5 富含GC片段的PCR扩增
% |# y1 S$ ]8 A: H6 精确扩增大片段的技巧/ F8 m8 Q8 B; \$ l" f
7 PCR引物设计3 s4 h. |* R# P/ O6 S; ]
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
4 o/ E: A8 J S' C O第2篇 样品的制备1 h0 r }) n" u) h9 m& c
9 DNA的纯化* A3 }4 g: l) I$ A. G8 z% p& m1 K# m1 N
10 RNA的纯化
$ P3 Q- A% B- {( G, ^- h11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
+ \% O! s- _; ^% F3 F12 克服PCR受抑制的策略
) m. c7 |5 C9 a) z1 H第3篇 RT-PCR方法 W9 W j2 p8 a# S b4 q
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用3 F4 H5 ]1 P" M! V# a( P% v* M
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler" K( h9 {& n- Y6 ?0 I4 Z
15 定量PCR的新技术! @# s6 Q5 T j
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
6 v( {8 \) K: k9 L1 \$ r u# o第4篇 PCR产物的检测:专门应用: d. r" {, m& b4 X
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
, e' N9 w8 A; `18 单链构象多态性分析
" u3 R) O2 k3 A6 k9 i19 逆转录酶原位PCR
4 K% B6 {5 E+ ~' r, _3 U. ?. z20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法* o+ z9 f* \7 m5 [
第5篇 用PCR分析基因的差异表达7 B* I- r C8 `% o/ v7 w) {
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用 B8 Z: D% a _( ^
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
6 R) _2 j. I$ u- |% y* t: {* Y9 G23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术4 w2 k! W9 x8 p. p; V3 z) F
第6篇 用PCR进行克隆1 k; i' o, i7 j5 T
24 以PCR为基础的文库筛选方法# s' e9 m4 J5 i; }9 Y
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进 `0 M( w$ ~0 z- x
26 用PCR合成和分析DNA文库5 a8 a$ [' J; `, e" F) {
第7篇 PCR产物的克隆
( b* t. y6 ~ }; e+ `' v% C27 克隆PCR产物的策略
- x4 ~* R. X' ?! e1 _5 k* y M# E28 PCR产物双向和定向克隆, o/ ~% G1 q4 |
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
7 u# y, w+ D* j: `" K第8篇 利用PCR进行诱变
6 n, e6 V6 C8 b; K0 w30 诱变PCR
) P% t/ D$ n3 f31 快速PCR定点突变
# }: N, c8 u$ H% P* [32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
* S% F; j% w6 c; U7 w; }4 q33 流线型基因装配PCR( [- i9 X. K* Y/ _( c
附录1 专利& c& [5 {3 b& e9 q
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰/ |+ e' K5 b$ P; C* @* `
附录3 注意事项
: ^6 s! R% I& w; W% I1 S, w' K附录4 供应商5 r; M7 k4 E2 [" u' L
索引
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