本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky1 [# |5 @' L3 I' _7 l/ |
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
* T) @: |8 q7 }+ C- W 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
! H2 z, w7 K! z3 U( I 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。) `7 h$ e7 T6 j m/ R) Y
4 G) Z% @: q: x" @ [; i7 `2 T
目录
3 V% [4 d' J6 L! W G. O第1篇 PCR导论. g9 n) Z2 l- d
1 建立一个PCR实验室. h/ {; b1 Q1 L y: @2 m: B
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略- u- z2 W V: p8 @
3 高保真PCR酶
+ Q j" w" \& y1 @. |- Q# ]$ k& A4 f4 PCR的最优化和常见问题解析
( H0 @ e% z4 B: N" y ^/ N5 富含GC片段的PCR扩增2 o- ? _$ _0 c, h2 F% J$ h E
6 精确扩增大片段的技巧
' A0 [* O' U$ Q/ Y4 I7 PCR引物设计
1 M* e4 r* \% x/ n0 r+ e8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
" x% \& d: x( L. i! Y) b, `第2篇 样品的制备
( M0 D& r* P u" \ g3 J1 _$ Z9 DNA的纯化
5 o \; J" ~8 C10 RNA的纯化
$ ~. Y) u" ~9 G4 `11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达1 I L. H. D& g8 T& Y+ [8 N5 O0 P6 k
12 克服PCR受抑制的策略1 u& a. d8 \; X" W& P5 ?* Y9 v. d
第3篇 RT-PCR方法. f5 I5 z" e2 ]8 P+ i5 g
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
. m8 {. W; S3 I7 }14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler9 b6 U6 ]$ m/ \3 y; D
15 定量PCR的新技术
& j9 r6 E0 c& B( }0 c7 d, l16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增. r0 I6 n$ m' r- ]: ~9 k/ G
第4篇 PCR产物的检测:专门应用, \) g; k# A/ a8 V% u- t
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法5 l" [& Z3 Q4 ^ p$ V2 Z
18 单链构象多态性分析) ~+ H2 L8 V) N
19 逆转录酶原位PCR
6 @2 }0 v* v" |/ k1 n6 f6 ~20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
! U. J- ^8 y% ^* H8 I5 @第5篇 用PCR分析基因的差异表达) k6 w% t+ `, a: N+ ^6 G4 S5 i
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
7 P1 O/ K1 d: b y% V( d/ [' J22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因: t; d$ y; d0 j' ?3 |$ F: ~: @
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术/ ?, D& J' f& v$ A
第6篇 用PCR进行克隆
* J7 f3 T0 ^" t7 d1 W5 R6 T4 O24 以PCR为基础的文库筛选方法
; }: f& I' ~& Z: ]25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
1 u* z3 J, k0 Z; K, N26 用PCR合成和分析DNA文库
2 w: b( F+ B+ T, _第7篇 PCR产物的克隆
7 y! k8 z4 g# f Y# ?: p27 克隆PCR产物的策略5 q! s' W4 J: A, p" j$ D
28 PCR产物双向和定向克隆
: K6 G% E/ s6 g. X# V& u29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
9 O2 H3 j/ `; A3 s% u- J第8篇 利用PCR进行诱变+ @5 d' M# Y# X' D; H1 Y! ^
30 诱变PCR" X6 ?% z3 y. V: `2 v, V
31 快速PCR定点突变
# ~% w" q# \ [/ |3 G+ i( ^: G# M32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
e; U; t6 T0 Q6 k2 e33 流线型基因装配PCR
- H- w4 F- [& A n2 M$ R附录1 专利 ?) k4 b5 R) o ?3 d" `# Y1 X
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰' H- _- J9 W( e* V7 x
附录3 注意事项
" R% G3 w* j7 W' B附录4 供应商7 ~: i2 P- h3 J1 x
索引
& j) ?3 Z, t! ]% C+ q
9 ]% M7 v1 |0 Y9 S9 a& T) ?) ^; Z& `/ z
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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