本帖转自:http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者:walkundersky
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3 \7 T! `+ h6 w: ?' `9 M: l聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来,经过不断的开发和改进,现在已经广泛应用在诸多领域,是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
& A/ J. V6 K( J, {8 f/ M" a 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer:A Laboratory Manual第二版的影印本,是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿,是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进,从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧,无所不至,令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
: Y6 C) ?0 r) ^+ s: L% x, ? 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇,可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考,既是实验室必备的工具书,也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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) L) b8 N% {3 T- D目录
8 p+ ~6 c: f, J: K7 ~4 C第1篇 PCR导论
/ i) C3 Z5 j" u% ]1 建立一个PCR实验室1 H( N7 w1 j2 ]8 ~ q2 z
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
' k' Z- U' { a3 高保真PCR酶8 J8 ^9 }9 A+ V
4 PCR的最优化和常见问题解析; O$ R5 Y& m& v T, B& R; @
5 富含GC片段的PCR扩增
# K& S1 W! A1 b/ G; S7 m/ J+ ?6 精确扩增大片段的技巧, c2 s6 D2 Z( Z& L1 Z# U s
7 PCR引物设计4 d5 o b$ {! ~) d. J4 v" u7 V
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序# |# J: P0 Y7 b) r
第2篇 样品的制备
# i( X- a) Y! N( w& {# r9 DNA的纯化
. \' x1 z( a) y% L7 x1 m% c8 u10 RNA的纯化
3 p$ j, M, C: v5 v+ b+ e11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达: b% d: d+ L. y: r
12 克服PCR受抑制的策略0 N2 L% M4 d. y8 a! o) X
第3篇 RT-PCR方法: {5 D' {4 ^' q
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用6 o Q7 i. c# }6 X \
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
( v& N o" K1 Z* c15 定量PCR的新技术
4 [2 N, ?. S* X) `16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
: p+ h/ |1 X5 G6 N% Z第4篇 PCR产物的检测:专门应用6 @" [" O5 ], O1 d0 k4 g
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
# X& P) V w" B# `* x+ Q- Z18 单链构象多态性分析# x( ]5 J7 W# a
19 逆转录酶原位PCR
0 A2 S' {/ B% v' h20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
3 C- [' h9 {9 n! n- G( J第5篇 用PCR分析基因的差异表达- l; z5 X/ \" |, o
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
$ L n- W/ I) ?) S0 x5 c22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因8 q3 @9 O2 k a8 }0 T
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
* O% p5 x1 q* ~! C( K* ^第6篇 用PCR进行克隆
8 O" X, C n# @3 q24 以PCR为基础的文库筛选方法' d, _( O3 g1 V8 j {% j- |
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
6 }! ]9 P2 K5 H- C5 a26 用PCR合成和分析DNA文库
, A' K" x) x+ Y5 r第7篇 PCR产物的克隆* P3 M2 w6 a2 O1 K9 A n! x
27 克隆PCR产物的策略" e8 E0 ?. _7 M( c1 f. R' P
28 PCR产物双向和定向克隆
( P( U' Q& I2 h8 V29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建% E% q! C* v' u. T$ k- {6 I1 M
第8篇 利用PCR进行诱变8 d: \7 c0 p5 t
30 诱变PCR
9 D* L9 a9 C/ a31 快速PCR定点突变
$ w; @$ [& G6 W0 r) i* S5 K, U32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
0 D0 }' t9 K1 ^9 n( }4 c; g3 ?33 流线型基因装配PCR V. H" O* V- C; [4 i
附录1 专利) g. E3 v6 [5 @# [: F% I7 ~0 W5 @; A
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
' m4 `1 B" A- h9 C# j2 Q附录3 注意事项
% y4 Z! O0 W5 l- v( L) V附录4 供应商/ c0 }6 E3 X2 Y6 t9 w
索引
' O. v* e5 b# W- c; J& v; U" J4 a [/ I4 U. {; _
# s1 W* @! X" e! m. H5 v下载地址:9 E2 Q8 m. t2 Q) y! R7 S# X
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