本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky; ?4 Q! O% }7 L" l2 c$ r( X( V% h
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
1 y% O9 @+ v( h% i' l9 y n! Q8 E 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
6 x& T. h, _0 N; p3 D6 j! f K" ]1 K/ g 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。% y" Y0 ~7 \( t d! |" [: @4 i
1 v8 }# p# T. k% _- Z, h D P4 i
目录1 C" e" s9 m$ y3 _ W
第1篇 PCR导论6 m5 r2 Q4 X0 a$ D5 P5 ~$ l
1 建立一个PCR实验室
' k m1 `5 v# [5 ^- s# ?9 x2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
/ D$ o( r: ] A0 @3 M( C+ U- v' ~3 高保真PCR酶& E E0 b+ f0 @8 S7 t0 I5 {: J
4 PCR的最优化和常见问题解析6 r1 J* I! t' d% e
5 富含GC片段的PCR扩增% c/ C- y3 b% ?4 p
6 精确扩增大片段的技巧! ^; |$ C, W! y
7 PCR引物设计4 z( o: [; J; U" V% S
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
; C7 h: _9 K) d+ z: T- x+ |第2篇 样品的制备& I m, P& Y$ }7 ]4 x
9 DNA的纯化4 k0 E# r8 v% i1 h
10 RNA的纯化8 g; g# |& V1 ~% R/ b
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达) N$ S; J: U" n" v9 W4 a, B9 Q
12 克服PCR受抑制的策略8 ^7 s+ D7 R' ]. [! Y
第3篇 RT-PCR方法# k' K5 E d! P8 w2 E3 i
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用- E0 }- ^& }' n8 @% L: E
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler* \3 G/ j# G# Y( a: M
15 定量PCR的新技术6 k" t- A: Q% V' j1 a' s% ]6 l" r
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
. I% L& R- b9 [第4篇 PCR产物的检测:专门应用8 }' Z, G$ S1 G0 G
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法# n0 \8 K+ ^9 {4 q+ v/ b" z
18 单链构象多态性分析
5 t5 f+ m$ q# v3 F8 ^19 逆转录酶原位PCR: v& P* N. B% P) t0 Q' Y
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法" v5 ~# c9 |/ G: k: J$ k
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
3 y: W' C' b" M1 T3 u6 D21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用3 q2 X0 {, ~5 T1 V+ K; t% }
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
2 G4 M# ?4 ~8 U) C2 R$ p23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术5 r/ g% e3 C2 N/ h2 f- S
第6篇 用PCR进行克隆5 s3 D- ~' D- K
24 以PCR为基础的文库筛选方法4 g& m& ]7 A6 {
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进8 F. r _# W# p0 L& _" H
26 用PCR合成和分析DNA文库+ K# p: a9 f- h, v2 @' a- Q
第7篇 PCR产物的克隆
: S5 P7 Y" u# f" v. u1 u27 克隆PCR产物的策略
) o* b+ M6 X9 z: G9 `28 PCR产物双向和定向克隆: v5 g' P1 P8 F- O
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建5 `8 Z! E7 `/ @' ~) v" E1 M
第8篇 利用PCR进行诱变
6 Y3 \" x! a/ ^$ s% Z9 v/ x30 诱变PCR9 D% F0 k$ ?' B5 }$ y3 D
31 快速PCR定点突变; k! z3 a" y2 @ ?* j' s
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因6 j- l6 e+ {" V* e
33 流线型基因装配PCR/ l* Y$ A$ y& K4 X+ K% C
附录1 专利
9 Q; e$ o# w, Y, M* \附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
* S4 P0 [4 V& v3 s I0 ~附录3 注意事项
+ p; y! }! q5 }) \( `, }附录4 供应商
4 Z5 ^, m! K0 ~, j, O索引
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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发表于 2015-2-3 21:51:11
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