本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky" A5 `* @+ L7 Z' `
7 t* P8 E" h) c' U5 ~聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。* j4 |$ ^7 E. d8 M: B' ]8 l
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。5 W# ?- ~7 _2 n/ I
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录: C" q) I; f5 k# B1 o ^
第1篇 PCR导论
; B& O o( t: M/ M1 建立一个PCR实验室
1 J) e" x; ^4 l1 Y7 @ n, s2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略+ N; d# F! `& @
3 高保真PCR酶
6 K# v4 w" Z; U& ~, t% H% c- M4 PCR的最优化和常见问题解析
( Q! A# V) m* D5 富含GC片段的PCR扩增
1 ]5 x/ @+ s. A' ~' z# G; c6 精确扩增大片段的技巧
/ W- x" ^9 G5 u6 g* T7 PCR引物设计
$ a: x1 r6 T7 B& K( Q0 W# J8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序% o$ M. i' E" E
第2篇 样品的制备
) f4 c$ v9 _* w9 C9 DNA的纯化
0 F# {/ P \" @0 M1 Z10 RNA的纯化' E. N* c1 d& u Y+ M% b
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达( I% d5 s0 k/ `7 A" P
12 克服PCR受抑制的策略
2 T$ s' t, I! `3 f3 |, o第3篇 RT-PCR方法
1 d/ x& W* Y8 D( _: `0 D+ e9 @% M13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用# {* F& F4 i( f5 \: r; r
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler: e4 c2 v8 f! u( _
15 定量PCR的新技术. {5 C$ y# r4 R$ M
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增2 s9 U1 I8 y: S
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
' j5 C% f7 }3 g( n17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
) D$ E. Z, W$ f% G; u18 单链构象多态性分析1 E; f9 K' z8 Y1 S+ @4 q
19 逆转录酶原位PCR3 s M1 M8 R+ P6 L% Z n+ S$ w/ a7 B
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
+ L8 Y) m- D5 o' N& t第5篇 用PCR分析基因的差异表达7 D: W# g" N9 T/ ~5 P# b
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用: t: h) ?( g7 I/ @. b
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
% l D" p" s" G23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术/ c( r* X3 {; I
第6篇 用PCR进行克隆
W# {1 Y% m5 N0 k( K24 以PCR为基础的文库筛选方法
3 O( c9 s; N# v5 L. u( R) q; m25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
3 V# h" \' W6 N- k: d% ^/ D5 A8 f4 h26 用PCR合成和分析DNA文库
. ]/ [- @7 s$ }; L, A. C第7篇 PCR产物的克隆% n4 T$ i" K8 X9 p: E4 z. v
27 克隆PCR产物的策略
' Y( B/ K0 K5 L# q! F& U28 PCR产物双向和定向克隆
# m( t( R5 l$ [- e F& N29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
4 ? [' N1 P2 d! J0 Z& M/ z第8篇 利用PCR进行诱变
1 h2 R# ^4 O/ O5 H6 {. R30 诱变PCR9 A# Q0 S! F( n- O6 P7 d0 ]
31 快速PCR定点突变* o9 {% S. x( ]8 y, C
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
6 T, Q" G$ C% M9 {, e2 H33 流线型基因装配PCR$ p, s! y3 b1 d9 t
附录1 专利5 _/ Y/ a$ T- G N
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰+ F X, | m* T" ^+ E- z4 ^
附录3 注意事项0 r2 V+ e7 y1 `4 ]% d X4 v; C" F
附录4 供应商
. p- a: Z- B% v" Z! E: L! ^- q索引1 j& e2 w4 L8 I8 S
, L& E: p# f' ]+ E, `5 D
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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