如何提高杆状病毒的滴度？请大家指点指点

cao1976

原贴由yakiry发表于 2009-7-27 23:41

各位兄弟姐妹们。。。。有没有什么好的方法提高病毒滴度的。。。最好能达到1×10的10次方pfu/ml

cao1976

mn123 发表于 2009-7-28 07:43 ：要求太高了，请问你们现在可以达到多少

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zhpu2008 发表于 2009-7-28 09:51 ：你好，获得最佳的病毒滴度，这与你的种毒滴度和细胞密度及培养条件有关，需要你自己优化一下这些影响因素，才能确定下来！

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cao1976

yakiry 发表于 2009-7-28 14:10 ：现在一般情况出来的有1*10的八次方。。。有没有什么超离或纯化的方法。。。
这么高的病毒滴度估计靠扩增是不太可能的吧

要不是这么高我也就不问了。。。大家帮帮忙想想

cao1976

gpj402 发表于 2009-7-28 23:12 ：ݺ没有听说过经过超离后的病毒可以提高滴度，不过可以试下。
病毒的滴度和病毒本身也有关系，你的插入片段对病毒本身的影响越小越好。10的九次方的病毒我测到过，不过也只一次而已，大多数还是6次方到8次方之间。

cao1976

yakiry 发表于 2009-8-3 23:36 ：ݺ我尝试的做了下40000rpm超离的方法
发现可以提高病毒滴度大概10倍左右
做了离心30min和1h的两组
分别离心得到上清和沉淀（拿1ml medium溶解）
把原病毒和上面的四个样品分别做了virus plaque检测（一天做五块可累死我了）
原病毒大约5*10的七次方
30min和1h结果差不多。。。上清大概1-2*10的五次方
沉淀有17-8*10的八次方。。。效果还行
打算再离心多点的病毒看会不会好点。。。感谢各位的指点