本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
: {! {# ]8 l; c7 Q) U' \ ?! Q 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
' T( |. |. z% e6 ~1 ^ o 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。. u* t2 b1 F/ C( A& J4 l* |
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目录
' \. [* U7 u( i- h第1篇 PCR导论
; F6 I/ z4 l: ^6 V1 建立一个PCR实验室& G& R2 c& s; t9 x3 v% L
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
. e# I' h% m1 K. O# a2 I* g4 ~3 高保真PCR酶; d6 g- C/ d( v/ e; ]5 L
4 PCR的最优化和常见问题解析
/ | @; e {8 @( }2 i5 富含GC片段的PCR扩增
; z0 q* B0 o/ S+ C2 r2 j3 ]; [6 精确扩增大片段的技巧1 _6 g# `. l, A8 W5 ~
7 PCR引物设计3 W( e2 K/ D* x; J2 d" e7 U
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序2 L( l6 S- O; n* E2 Y* J+ @
第2篇 样品的制备- t- z" v+ Q! d5 L; ~0 o1 {
9 DNA的纯化
' M1 P; Q2 P' }6 }7 _; c. F10 RNA的纯化
' b/ k0 _: X' _$ l7 Q, w1 d1 u11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
5 R, K4 o' U6 f# w9 l12 克服PCR受抑制的策略
; B; y* Y! L7 P第3篇 RT-PCR方法
. z1 I* c6 U$ S% a+ G* L13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用, I* B# z6 [% [8 Q
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler% k$ l2 }1 g" N7 z7 t2 H ?: P
15 定量PCR的新技术1 e, E$ E2 z! b3 I7 B
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增- `! ]- L- d* J
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
7 G; `& i( K3 B17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
" \* E# L1 K. _* y0 L7 u18 单链构象多态性分析7 h+ @1 j c, \; o2 s2 c
19 逆转录酶原位PCR! u2 i( L; D, B3 m' Q! [
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
) w: ~2 A# [( F& ?, \% ~4 |第5篇 用PCR分析基因的差异表达
% x: L5 q; S- f/ ^1 }7 F0 {21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用6 |8 \2 i& W% r" h9 h
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
& D6 ]' _- y" N2 d) a3 [6 V$ h0 u7 _23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术: G" h; o3 F; ?9 P, ~) v
第6篇 用PCR进行克隆
) B# I Q& i6 [5 q/ y( `* s24 以PCR为基础的文库筛选方法
: K$ D2 d v! \/ c) p, _- n25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进* W% ?4 X+ F6 X5 H* X- G
26 用PCR合成和分析DNA文库* I5 O* z: r/ Q2 ? Z. W
第7篇 PCR产物的克隆
3 J( d2 q. \' O3 D27 克隆PCR产物的策略# W* _/ H7 ?' L) l% e( E2 S( Y
28 PCR产物双向和定向克隆% y5 W" @5 a7 C7 A: d5 r
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
' u) s9 g9 N+ ^$ f第8篇 利用PCR进行诱变( G7 E. s# N& j) l1 Y
30 诱变PCR/ h5 W& |% y. p
31 快速PCR定点突变
; ^$ R) m4 a$ g! e5 k7 P: t32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
+ A. m+ W' B' y- Q33 流线型基因装配PCR
/ Z/ P2 @% M; r6 e/ v附录1 专利- B, G% y( ~7 O5 g* K
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰! [* L/ Y C3 F4 T" C9 v
附录3 注意事项
% |% |$ ?! h Z8 [' s [附录4 供应商( D; l* @- B9 r- y
索引
# N" |; g A h/ T' `* i& a; T. I% L1 @7 x; d2 F
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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发表于 2017-8-12 15:03:20
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