本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky9 r" h4 W9 T9 K8 ]( d: M7 N# Y
- k2 A; V4 C; A2 Y3 [& s e3 \聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。0 g h [# }! `/ X$ f) o
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。 ~4 p! q7 Z+ d4 K5 r
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。 l9 b3 z6 P2 C* C/ e0 y( |/ [7 U
. W9 L8 o9 p5 o目录
7 h2 k# T! ?- W9 w' r9 r% r* o第1篇 PCR导论
1 [: Y! M+ S9 `( n8 o1 建立一个PCR实验室/ a8 a6 G( S" _1 U- H
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
& b9 k; ?- t/ ^" `3 高保真PCR酶
8 j3 R$ W& U& J9 h J2 j4 PCR的最优化和常见问题解析
: c% X W9 B. \' f9 W9 I$ { x( s+ X5 富含GC片段的PCR扩增
9 A2 U9 A) h; Z# X6 r6 l6 精确扩增大片段的技巧
7 E& r6 ` ^3 _8 U7 PCR引物设计1 a; t. n. L) L$ l; g) \
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序 O& d- M* R, g# y
第2篇 样品的制备
o: ^% |, j4 q8 m: G9 DNA的纯化
6 g( x3 L3 ]+ ~10 RNA的纯化( E/ N+ b( p3 N. p
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达0 c ^: C3 T4 R# q( V# e+ X' n9 e
12 克服PCR受抑制的策略
1 r, l% H, T5 J; a第3篇 RT-PCR方法
. O+ |- w: \$ r" a# Z% ]13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
/ N" u0 r1 X9 V8 w14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
- W/ R: W0 ^; X) t15 定量PCR的新技术
8 A( E! V) O2 _# N4 c16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
( M5 }# q+ t/ R8 Y0 \) a/ y2 d第4篇 PCR产物的检测:专门应用
% H4 t: v0 c7 f* w3 E( ?" X" U17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
/ c8 F- _% s$ g5 O# T, S" L18 单链构象多态性分析
0 g e* k7 \+ a. `19 逆转录酶原位PCR
1 t2 U' Z1 w* \ S* K, y20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法4 T6 w; c3 j# s3 r0 }: b& F
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
6 j. S6 V% P7 {& V% i: F( M) M& i; x21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用4 l4 v7 \. j/ D |
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因, H" S1 R0 Z1 D" w, y+ M! u
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术5 {& x2 ^0 m0 |
第6篇 用PCR进行克隆
. p6 p6 [! ?/ Z24 以PCR为基础的文库筛选方法
: F; O: K; _! C+ }4 K! Q25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进. g" K0 L5 @# G
26 用PCR合成和分析DNA文库
( Y9 U: n: A, ^/ q* e第7篇 PCR产物的克隆7 x6 q4 n: e I
27 克隆PCR产物的策略
/ m7 Z( v0 o- o6 [, I28 PCR产物双向和定向克隆$ b% \& A$ z( e1 B Z* e
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建 h6 v" w5 @( ~1 b) f% Z$ h1 |. ?
第8篇 利用PCR进行诱变 w9 Q6 j( n4 E
30 诱变PCR
/ C9 L* ]. @; f! f8 a$ J31 快速PCR定点突变
! J! U q3 Z" C( j0 L32 利用PCR来突变和合成新的重组基因4 |* T, ]. f* M! S; r/ ~- i
33 流线型基因装配PCR$ N6 _* ^* h9 a7 }
附录1 专利* ^% S5 [ V6 v6 x/ Y9 v' ~/ a. d
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
2 P0 d" Z ^% v) `4 |6 y$ G `+ U, S附录3 注意事项
$ Y5 v, ]* X+ U附录4 供应商- ]* N% V# w9 S ^
索引
4 p# z- X. I% `' @2 h/ w- x# S' u9 t4 `0 i) r
2 I6 y! |& v& l0 ^下载地址：" C- g# q: S7 o4 d& e, k* |
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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