本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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+ z# f* o& {, T/ X2 F3 ~聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
9 u, v6 ~! u; a; X' S. ^$ D 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
: t+ p- I2 ~+ ?) P+ r 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录: r' R$ ~ }" H. l
第1篇 PCR导论2 t6 y( i$ e- f5 z- w
1 建立一个PCR实验室% u- T1 {: ^* o3 B- F9 |( @: ~4 E
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
8 y/ E: I9 }) F& X/ x* H! H3 高保真PCR酶7 _+ I1 ~8 U1 Z
4 PCR的最优化和常见问题解析7 v% H# F; {8 `' y
5 富含GC片段的PCR扩增( P+ w* Q+ C* v P" t. ~( K) i
6 精确扩增大片段的技巧- P9 H0 V# N/ C w
7 PCR引物设计
8 r3 Z9 W; ?* B8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序* o! B4 V" m [; B
第2篇 样品的制备6 G% T g, f4 [7 J6 e3 c9 F- A% L
9 DNA的纯化4 p. `0 a& b; D9 N
10 RNA的纯化
% d$ u* H& I; s' i9 o" d+ N% E1 ^11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达6 Q! |! C3 }& e$ x x
12 克服PCR受抑制的策略 Q4 {' w1 Z* ?0 E% V, `7 L* o' V
第3篇 RT-PCR方法
. `7 R/ z2 [0 H. a1 z13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用4 `% |3 v+ A0 K3 Q: p
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler. H/ M8 k, v6 T& `
15 定量PCR的新技术
! G$ ]& {: n9 P% U6 T( t& d16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
& B+ ^8 _) w1 l5 J第4篇 PCR产物的检测:专门应用( ]& P7 y5 q: r, |% F0 X
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
4 h' w4 K) x. y7 s8 l18 单链构象多态性分析
9 r% t( u* q7 Z3 u- ~9 y19 逆转录酶原位PCR
5 Z' o! s/ p( g20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
( B, w* i$ v6 n( C' D/ g3 Y第5篇 用PCR分析基因的差异表达
6 t5 [, Z3 ?) z( y1 _( K9 W2 D7 y$ Y D21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
, |% P5 r" x" L& l22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
# M3 W' [5 l0 I! L. k. d% U23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
N5 v' W8 L! m1 y+ {) A# e4 A! L第6篇 用PCR进行克隆
7 s9 n& j) c! Q24 以PCR为基础的文库筛选方法# h* {8 N5 E8 g @
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
6 a8 q+ |6 M, e7 f26 用PCR合成和分析DNA文库
: s, a; B! u p, g第7篇 PCR产物的克隆0 P. D5 v7 |- i y( v
27 克隆PCR产物的策略6 u# L3 x8 y" t1 ^3 U8 H
28 PCR产物双向和定向克隆
' C, u' g& q/ G, c/ i29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
; ~) @; Q8 C5 |, k$ s. p第8篇 利用PCR进行诱变7 l- R+ G& o% C$ r1 y+ Q
30 诱变PCR
3 p! o& `& m2 k8 X) b9 ~31 快速PCR定点突变
8 S1 k4 P: N$ Z- S0 k3 ?5 x. A1 q32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
8 }& I+ y6 A L. @( M/ }; P33 流线型基因装配PCR4 [& M6 b) Y1 s# T2 u8 [
附录1 专利
) d. K5 r O$ C" o8 F附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰, }; Z: |5 }! _ Z
附录3 注意事项: c9 i% q" p1 Z$ y: e& F! ?
附录4 供应商
/ ^4 ?: C2 i' u! b& u3 D索引
2 K$ l% p2 K! A1 p5 o) s6 d1 }: j, [1 B, M3 c
: y) m( p2 |+ I下载地址：
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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发表于 2015-2-3 21:51:11
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