本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky1 Q1 v8 F, g# G" X: K3 m6 K
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。1 z3 {; F( N4 m7 _0 i& l8 e
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。1 w& h1 x" }* Z- w: |5 f$ I# N
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。! m; T5 @! W2 C3 \" |6 C1 D
- V* z! x T* E目录/ g, {. l# O: E
第1篇 PCR导论; w/ {' M y/ R/ y H" P
1 建立一个PCR实验室0 O( O# y9 O" J" h9 O% P
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
$ Q1 q; S; L g3 高保真PCR酶
2 L, }4 Q& a. O1 E- p. C& }4 PCR的最优化和常见问题解析
9 G; l( N1 V) p' I9 t" J( c( Q; @5 富含GC片段的PCR扩增7 n% U/ g& x2 p H; @
6 精确扩增大片段的技巧
' d; s3 U- t# r/ a9 i1 k7 PCR引物设计
& Y9 P4 E" t1 B: k* S8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
- e) S- Y- D* k- D: ~* A8 v4 ^第2篇 样品的制备$ t; O. ~$ c. Q. L; A @
9 DNA的纯化% S7 J& ~" p9 P( U+ g9 P
10 RNA的纯化; U$ f9 P: Q9 }3 U( [9 {0 J' M
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达- d+ `4 e W5 u3 d/ c* g7 a2 h, ?! [
12 克服PCR受抑制的策略
2 B& Q: E* U6 N' T& D( z) u第3篇 RT-PCR方法
# K0 Y. L7 x5 `8 r3 `13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用8 g$ e3 X- r! o* ^
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
) r: Z! H$ s5 U15 定量PCR的新技术
+ ]6 I4 L8 q5 \2 f! W2 P16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
, ?+ Z# J6 b3 W7 S. H9 c5 B第4篇 PCR产物的检测:专门应用" y% k1 K9 F) X" B
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
1 J# Z5 K9 }3 m4 }( N9 N' c6 u18 单链构象多态性分析
; J% @4 Z0 o: m6 t v19 逆转录酶原位PCR
- r1 w( M) K& p1 _20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法3 u+ ]# G# C; u9 W) m2 C. l- }: o
第5篇 用PCR分析基因的差异表达" M5 U/ X2 t% Q- a/ I' a. T4 M" K3 F
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用2 w) v7 Z% @# y# I" n2 p4 y* {* L
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
) Y: d. J( e' L, B9 ?23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
" w3 d% C4 `( K6 A* v; P第6篇 用PCR进行克隆5 R6 k, S* x! T9 _- i
24 以PCR为基础的文库筛选方法
) N9 y, E9 r S; x25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
- K' X/ F* `, s9 S6 Q L' ?% u `26 用PCR合成和分析DNA文库
% l- H0 c B: {8 E( v% R( A第7篇 PCR产物的克隆3 [5 s. [& {" o1 H$ F
27 克隆PCR产物的策略! q2 K" T0 r' q2 V4 R
28 PCR产物双向和定向克隆
/ b* `& r' |9 S2 ^29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建; ?- @1 \5 m" p
第8篇 利用PCR进行诱变# x3 M" o( U2 [% d; d7 M
30 诱变PCR
7 _8 k8 z6 |$ ], O/ M5 J8 F31 快速PCR定点突变
9 _# I* S5 V/ V# j3 \! n& P9 V7 e8 V32 利用PCR来突变和合成新的重组基因2 X* Z# ]) B W( ^! ?1 ~1 T2 O
33 流线型基因装配PCR7 `3 ?) q2 M8 ]( C; m
附录1 专利6 k8 H J& n! |! j' u* N
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
3 f4 P. ]! ^+ [) a4 S( h附录3 注意事项4 I4 O+ q+ R- Q" \2 z$ Y
附录4 供应商
5 [% q! k7 U) f5 s( R* l' u索引
% u: J, [$ k* L# O8 F
_8 b1 u9 B5 X' A8 i
3 u4 k& S! S- H( i3 L9 C下载地址：5 R8 C+ |! Q# O! ~
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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