本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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- g# r7 A5 N& T聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
9 c( s9 g9 |+ Y: v d, M 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
+ p B( }7 g1 T- ~+ H7 [" z 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。6 ]( N6 q( l1 @- I# R2 T1 ?' ^
2 n4 R- h" m1 g' o
目录, t2 T5 x4 e7 b% X. q$ ?
第1篇 PCR导论* Q" }& I, K) G' t- X; V
1 建立一个PCR实验室
) B A5 j* c6 w: i2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略$ }2 t$ r& C3 h }( l( T
3 高保真PCR酶2 I; _, B* J) s* |! `" x% `" e
4 PCR的最优化和常见问题解析1 @4 ^2 r' ?' }7 G/ K" X! Y& N
5 富含GC片段的PCR扩增$ d: p4 {* w& d3 g) M
6 精确扩增大片段的技巧7 O& t& [9 z% \0 y9 e
7 PCR引物设计" E2 q% J# e( L9 U& A0 i
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
+ W" \! W4 }2 J第2篇 样品的制备( X: a% i( U5 q) o0 M' w
9 DNA的纯化# C9 W( N! J ^% O7 ]: f
10 RNA的纯化
% j* O5 ^/ C& I11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达- {3 i$ R+ z- j. J3 h* B
12 克服PCR受抑制的策略
% S% O# P0 L$ Z: ?5 `6 A) o第3篇 RT-PCR方法% |- ^3 A) f+ H8 o
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用4 o1 x4 m8 F' o( f7 C
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
5 h; L4 \3 r5 Z; Y+ g: e0 c- u15 定量PCR的新技术
4 M5 j6 {# V: ?: u1 W16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
& m6 B9 E4 G8 V4 Q0 [+ l+ m第4篇 PCR产物的检测:专门应用
2 [8 i- h, v: u/ E/ H4 `17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法, u8 J3 B* Z. m0 i" Y
18 单链构象多态性分析
+ O9 G, A% ]: s) c \0 [5 K19 逆转录酶原位PCR
5 q# L* P" E. h9 S( Y. Z20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法( G: D" {4 \$ |2 r
第5篇 用PCR分析基因的差异表达) d0 K- Y9 \) T3 U
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
3 U5 V6 Y+ ~. f7 E& `( M22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因& V; @& q5 `- J/ q7 T
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
- r; h. K$ |1 |, N, m% @第6篇 用PCR进行克隆1 R1 a. q9 z8 h1 s
24 以PCR为基础的文库筛选方法
! K$ {6 ^$ X; E" B+ V: K$ R25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进' k7 V+ X6 j1 x0 O3 a j+ c
26 用PCR合成和分析DNA文库
& j& \' }4 [5 n! U第7篇 PCR产物的克隆1 H6 L4 ^/ ^. M" L2 s
27 克隆PCR产物的策略! v* B5 G7 ?. X4 u
28 PCR产物双向和定向克隆5 y- E! d6 ?0 q! }5 F
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建" t. e! m# O* I# E
第8篇 利用PCR进行诱变
+ _; L. C0 e3 x+ M# k30 诱变PCR1 _" I% o% e, @* t5 s# }
31 快速PCR定点突变2 m3 `$ p+ C3 Y: M Y {
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因" o' q2 ]0 |3 s3 q# U
33 流线型基因装配PCR( `/ ~! p( y0 U- M8 ^: b) n) ^
附录1 专利# |+ E" O5 w4 w# k$ I8 M' z) e
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
# j& r* w; J- E8 r( y) E附录3 注意事项6 Q0 b$ a3 u8 J a5 U, z1 j
附录4 供应商# z I% P9 v+ P+ C! ]+ X
索引3 n0 J3 i; x8 Z( i
9 ?7 M) Q5 z2 A3 q
* l- S; O3 Z) e3 S
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