本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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$ e5 z( R) h3 U; J聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。) ?1 D4 f% R [( h: P4 C2 j
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
' w2 x( i5 u( p$ N; X 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。% s1 H: C* D: f" p& o! b4 j+ a) p/ w- n
K8 W+ s( Z: `# ^2 O7 X; S: \
目录- p0 |6 K8 d/ ~1 s: m
第1篇 PCR导论
' E# H2 b! R, d3 Z! X( c3 d- u1 建立一个PCR实验室
. i/ Z" m! F; w! a) q2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
& Q7 `7 C+ ?! P3 高保真PCR酶+ s$ G2 m& P' S: G% ~% ~
4 PCR的最优化和常见问题解析2 c5 e2 |+ n7 ?# l/ f! f
5 富含GC片段的PCR扩增
" Z3 L/ |2 b h. p: ~6 精确扩增大片段的技巧
$ k- |7 M- t) K- z* g$ U5 u7 PCR引物设计
+ I. x. N9 k* _8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
" \; q8 H; U3 `" x: D/ P3 S第2篇 样品的制备* Q+ S! o3 x* e7 n. c3 m5 K- c
9 DNA的纯化* L7 P$ f# I8 U0 m, M C9 J0 V z
10 RNA的纯化) G! o2 h2 {7 S2 y: \( C# G
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达$ |! l: W& I0 c; O2 `7 ]1 |
12 克服PCR受抑制的策略
2 Y9 I4 ? `- l8 Q/ \3 A第3篇 RT-PCR方法" M' d- M D6 m4 u
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
) A. K/ f% K' a14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
; Y2 K; U+ t/ `8 h( Q, n& h$ z$ S15 定量PCR的新技术- v8 M) v0 E0 @$ J1 w( }/ R8 X8 _) H
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增% t3 q3 x9 Q: L/ k( e6 z" A: y
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
2 ]5 h9 j/ H, L* U% V1 v17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法2 v5 ^. g, h' f. i) X
18 单链构象多态性分析; r) j# F8 j2 y' c% L4 _1 R
19 逆转录酶原位PCR. Z0 E( Q" I1 G5 |6 n: J
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
6 l+ u; y( q( P5 n/ P第5篇 用PCR分析基因的差异表达. g+ ?' }+ Z% B& a
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
( r' W# d- f- p! O5 s# {4 Q22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因( g9 A( Q- ~' H4 e
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术! ], {$ v0 y8 q$ X) a
第6篇 用PCR进行克隆
! U. Q3 Q7 b* V; X/ S24 以PCR为基础的文库筛选方法* f1 h7 D# F# N0 q, |" s u# g7 F
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
+ A* h7 @+ V, f7 _26 用PCR合成和分析DNA文库$ T* X2 F$ \9 a+ u5 r# j, W" R
第7篇 PCR产物的克隆" c. E1 N( n8 \- f3 i0 ~- E
27 克隆PCR产物的策略: l/ d! V8 L& @" j2 y
28 PCR产物双向和定向克隆
2 p6 g1 H7 }2 V7 z5 R29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建! i+ I0 p! X- N* @2 F) M+ [( _
第8篇 利用PCR进行诱变
9 R0 K/ ^( b- x* B, _! w4 K30 诱变PCR5 w; G/ F) x7 }: f. J: q1 Z8 b
31 快速PCR定点突变, u. C' i1 x% k( i+ w1 L/ a
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
" n$ Q- L4 g6 i: I33 流线型基因装配PCR
' D, G6 S! U, g2 R( N) g' L附录1 专利
% Q' |/ Y3 Z: ^# l: u- q附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
+ p& r, `6 O8 G: C附录3 注意事项
c- h7 b% A0 P: i1 {附录4 供应商
) Z* D" y0 C9 g$ I3 a- W% F/ F5 H索引5 J; m" N6 \' \0 K
& y M% C6 F- E: u5 G
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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