本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky7 w. @9 k5 Z9 \6 M) N2 ]$ }
+ d( g# n. g7 c4 k' g- y0 C* d聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。" d5 M7 S0 D9 f# T+ v9 N. y/ l. N
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。' L2 K! r" W! ?
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录: d: u) L0 {' O4 O
第1篇 PCR导论% m; C& C# |% P# V- k/ ?
1 建立一个PCR实验室
1 w! K! R# n6 y& M5 _5 |6 ^: m+ S! M2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
" V' u/ J# u( h0 }! u" P& a% Y3 高保真PCR酶0 s7 U4 j1 W4 l0 A
4 PCR的最优化和常见问题解析
3 N: e$ a6 |# D0 \# j4 \& K5 富含GC片段的PCR扩增0 K. p. g( _9 v# }/ l
6 精确扩增大片段的技巧
2 }5 ]5 q/ Z7 L, Z& L3 N( L7 r9 \7 PCR引物设计( A9 B; C$ H. v4 s o$ ]8 ?2 I
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序/ I. e* P! ~; L" W) W6 O$ h
第2篇 样品的制备
0 C5 n3 r8 `1 R( f G) c9 DNA的纯化( ]; o$ t; a: Q! B% \+ ?; ]5 P
10 RNA的纯化' T/ b% S; ?% R+ I% v, u+ ^
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
( J# H/ s/ V9 P1 O: s; u* Z12 克服PCR受抑制的策略, b* V& F2 F' H; B r4 k" U
第3篇 RT-PCR方法
; P, q; H' s% w8 M13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
0 I$ s7 s1 C; s. g/ }2 `" T14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler& U7 C* a( f- {, |5 P% w8 m1 }
15 定量PCR的新技术8 Y7 B& G% f0 \# P+ N
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增 Q T5 ]0 [) \7 w' ~, j
第4篇 PCR产物的检测:专门应用1 h- ?1 n4 m+ _5 @/ T4 ~
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
, X6 R+ r9 N. a$ I18 单链构象多态性分析
% y; A. R' ~, J19 逆转录酶原位PCR: q: V( f" s" }- d4 n r+ y5 ]5 r
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
) u' ]* z7 N' D \9 j! i第5篇 用PCR分析基因的差异表达( T- ^& P' @$ t2 u$ L& }$ x& W
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用4 d1 y# Y% Y9 h8 J% \3 ~7 c+ A
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因: R& s3 G/ M2 X* F7 t6 q
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
R' l+ @ e0 [- E第6篇 用PCR进行克隆
: s& F n& U8 [* M" ~1 X24 以PCR为基础的文库筛选方法1 `1 }; g5 F% Q5 i: y7 A# x
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进$ [# k" N [0 H
26 用PCR合成和分析DNA文库
: W( d; t% {/ Q4 D% L) }, A1 F8 P第7篇 PCR产物的克隆
& [0 n# V" G( y+ H8 Y+ S27 克隆PCR产物的策略4 Z( j* A1 X! c! L
28 PCR产物双向和定向克隆
; Z& |) y9 I x3 t2 t# t" `, K5 s29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
4 M0 R3 q: }2 [第8篇 利用PCR进行诱变& ], s* J2 u2 D: f
30 诱变PCR
. [9 r; o) P3 i- G; l9 ^5 |9 x31 快速PCR定点突变
- K9 s% h7 j! r& G+ E; Q. {32 利用PCR来突变和合成新的重组基因' E$ {+ B, K& o2 e
33 流线型基因装配PCR" N: I) v7 `0 A. O# S: W( ^
附录1 专利
6 S7 l, V1 d5 b% z0 F& P! C8 B附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰, \( Y! b/ M* [( N9 o& w4 C
附录3 注意事项
9 \( o# b" J2 Q2 P f附录4 供应商
) w; t# ^9 J: P9 ?- Q: x R. d# p索引& ?5 D& t! D! d0 r a
; ^1 {, u& e/ ^2 W8 z
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