本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
& P& Q. l6 |7 \* f) f 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。/ M' s+ Y6 S& C
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。/ W3 y9 T& v5 ^& C) j1 K+ l) y7 }
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目录
& l; z; F6 W/ H3 J& U& Q' S第1篇 PCR导论* I& W! c# D; ~; ~/ ?9 _
1 建立一个PCR实验室
: [3 k+ ]& G7 d2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
4 N/ h$ g$ i& q3 高保真PCR酶
- Y# Q( F. n2 o: V, ~9 R) b: c7 G4 PCR的最优化和常见问题解析
' B$ [& K( T: \5 富含GC片段的PCR扩增
0 C9 b4 `& Q- |4 g2 d6 j6 精确扩增大片段的技巧
7 t' \: Y6 ]; D1 x4 W2 o8 t7 PCR引物设计+ u0 y% A+ `; A' J$ @
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序1 R& A6 Y, d! v& A
第2篇 样品的制备- n% ~5 u* O$ s4 v; F
9 DNA的纯化
; L' j! ~9 l- f& E3 c( @10 RNA的纯化! S! R9 P* r) x( u' C
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达# ^: L9 f( T( o3 n/ k k
12 克服PCR受抑制的策略
2 V9 k& ~$ g; Q5 ^$ i3 n第3篇 RT-PCR方法
: C# @& o8 |" |$ O* Z8 Z13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用, Q2 @" a6 r0 k! A: S
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler; m+ y- b; j: P6 E0 d/ x4 x# {# x
15 定量PCR的新技术9 Y* d, u/ c. V5 b) \4 w, h
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增" ? d9 e% g/ E8 u' K
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
0 S8 `. D% F, H17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法' e' f; g9 X g! {
18 单链构象多态性分析) V c6 z9 w" V
19 逆转录酶原位PCR. U$ b9 q" l/ R4 d/ k9 P7 q6 Q- }
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法+ C' L. m9 U3 Q7 r z
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
1 F& V1 C( Q( B$ w3 M$ a9 q& v/ ^21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
( s4 Y/ C% o% s# o K j22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因" |; _- Q I+ `
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术: h' S; O5 K8 P# [
第6篇 用PCR进行克隆, N# W8 c/ E9 F/ K" E
24 以PCR为基础的文库筛选方法
/ Y/ v9 z6 }* _) _7 O25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
8 O3 I9 P- C6 l+ V26 用PCR合成和分析DNA文库
; ]; R& F0 ?# r5 c4 x3 n第7篇 PCR产物的克隆
9 O5 t6 O, f9 H* |5 }+ A" l27 克隆PCR产物的策略1 {) U" j9 @7 j
28 PCR产物双向和定向克隆 Q9 ~ t1 `1 J8 `
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
; F( S8 v* o/ e/ a7 I6 N) x4 @第8篇 利用PCR进行诱变
# L& ^! H$ u. a @# w6 r' D# y30 诱变PCR
, }/ y5 g$ F: x$ P0 I9 u4 I$ e31 快速PCR定点突变: m( |: J5 g D
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因 P/ H1 |. s% F |) H& [% ]- E: T
33 流线型基因装配PCR I0 `: i) `$ d7 j J
附录1 专利
% @1 B+ g/ p5 q- B附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
: g$ F- u( n5 `* u3 s附录3 注意事项5 C# E1 Y2 {. r' u
附录4 供应商
2 d! n2 q5 T$ V( z* k8 M4 m索引
2 N- T) J l: ]# b+ v$ b
( x/ ^! s# a7 t) D& G0 ?) I ?6 e; ]
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