本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。7 ]8 r7 \: K: P1 E2 N
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
6 D% \ F2 V3 n( J8 @8 f 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。/ F" C, i6 G3 J: p
" o9 l# R/ { h# G2 L目录: G; |. J6 v9 T' g* g$ V" h
第1篇 PCR导论
4 U. j1 M$ L' {1 F+ K% N1 建立一个PCR实验室3 J" X& c5 k5 S' J5 N) ]% ?# X
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
# a* E% c& o' U0 }2 @: v. n9 w3 高保真PCR酶
# w! m3 x5 P9 N5 ]! y4 PCR的最优化和常见问题解析
/ v& n# D2 g2 E$ S+ F' A8 A5 富含GC片段的PCR扩增
6 s( Z1 x F* n7 ^$ w* b. L- [6 精确扩增大片段的技巧' ^ ?* W0 E' U( g9 d
7 PCR引物设计
' K$ O" h. _" o# Y; |; M8 R( M8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
2 n1 R; y& W* _- {/ ~. C8 ?; D第2篇 样品的制备, s3 O9 y4 L' F4 @
9 DNA的纯化7 p3 N& `, |/ u% Q% j+ \- u) b
10 RNA的纯化
/ R* B$ T; ?, K/ `9 A/ A! r& W* S11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
7 N& m6 C7 q4 \12 克服PCR受抑制的策略
9 o) j; D/ ^' P第3篇 RT-PCR方法
! d0 K- n8 M# ?& [. a( W* p& K13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
" ]5 L, v J$ x$ `3 n14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
" c8 z- e, q2 O8 h* Q* N6 w, F15 定量PCR的新技术
( N% X. C, v$ }6 \" N5 {16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增" h( d" h! y4 ^7 E
第4篇 PCR产物的检测:专门应用6 g6 M/ t: w; n- a+ o
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法 E$ Z9 v7 {1 o; |6 L* ^0 j
18 单链构象多态性分析' e" |9 z8 h2 i3 n2 x$ Q
19 逆转录酶原位PCR
+ J( S* E9 \7 y: \" o! p5 q20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法' P+ g( l! l) w0 G! E3 P+ j. x* w
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
- g; L0 x- x n21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用! ^/ _4 B+ m _. {# J. p) J$ ~: i3 {$ L
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因4 D1 N, W% j5 g: ~3 L
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
`; T, F# e1 l) \( J9 |/ J第6篇 用PCR进行克隆# t* b. ?# E8 Q4 m4 s0 F7 U
24 以PCR为基础的文库筛选方法
9 `3 \/ n `7 e" w+ w8 h25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
X, Z8 f# s+ x2 T. t' F7 q+ p5 e26 用PCR合成和分析DNA文库
0 @* n6 C% a7 f ~, p: @2 ~; e第7篇 PCR产物的克隆
0 u! Y* _3 Z2 X( }27 克隆PCR产物的策略
4 J. d8 U* Y$ M$ u% Z) Y28 PCR产物双向和定向克隆
" e# W3 A: ^+ U& X& h- q29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建# }: n: z- q5 r: \# L- N
第8篇 利用PCR进行诱变. P+ P+ A1 X5 H7 Z4 h/ T
30 诱变PCR2 n. E4 F4 D7 n2 b- _3 `" h3 Z7 J+ v
31 快速PCR定点突变5 S; k) x& a8 X; w0 d
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因7 e1 E$ o( d7 o, M! z
33 流线型基因装配PCR: k) k b- `% ~
附录1 专利
' q& L' {% V2 ]5 z* s- P+ @' h4 p附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
+ T/ Y7 n" { u1 C" d附录3 注意事项, j8 r# j; F" M0 v+ m9 Q+ i! m
附录4 供应商" p) m) j: \) Z
索引, c" Q$ X/ B% h1 S9 W: c& \; o
; Z' K4 p8 T# c& B5 H9 S3 {
- o6 S. v2 L; C# U下载地址：/ c A9 a- u* F. m6 d: d
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