本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky# _0 Q5 ~ d; a; F/ j: h
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。, n/ X2 v5 H+ _7 [! |. ^
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。. Y* ]$ \5 h' z
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录
- h) {; K( v+ l f" K4 } ]5 |* s第1篇 PCR导论& P9 D# N% ^) C; q
1 建立一个PCR实验室7 D0 s' w& H% i
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略2 c9 l$ d" n8 c, F' N: M& r* N j9 V( j
3 高保真PCR酶
! J% \+ i$ I( u5 ]4 PCR的最优化和常见问题解析
4 e s) ^" e7 m( s% |5 富含GC片段的PCR扩增
' n2 T- O+ D* d! a6 精确扩增大片段的技巧
4 A! s2 ]+ a9 I6 }8 b# `4 r7 PCR引物设计
- E& n. ]$ Y! ~. U8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
$ A( f5 R1 Y8 K* ^7 V第2篇 样品的制备
. f$ G8 |: e9 y( A9 DNA的纯化
3 s) a" ^; E, {2 R! @ A5 e8 T10 RNA的纯化5 L: W0 u- n% y$ a. } p1 O+ X
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达2 T& O; w% ^: K9 I# Z
12 克服PCR受抑制的策略* d5 \ l# O6 v
第3篇 RT-PCR方法
" F7 t/ \5 u& C13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用& }4 d: D& N+ B- y. n6 b
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
% i9 w8 t; w$ a0 ~15 定量PCR的新技术% S! W% z; t" A% ]' A3 O
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
8 Q o$ k }# x8 e- N+ K$ e第4篇 PCR产物的检测:专门应用
7 s3 l( x( t. Y/ u17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法3 r; x$ X: K$ [0 g8 a& S' r' H
18 单链构象多态性分析
1 x- O7 M8 A- `; j; Y, `& P19 逆转录酶原位PCR
. O, Q# e4 A j8 m: E' _20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法8 G3 a! v$ A5 [- C3 v* C5 k
第5篇 用PCR分析基因的差异表达/ _9 n3 r/ K2 ?/ \
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
6 V3 o) l9 v( X# W) X+ Z22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
8 Q" ], w6 q" S0 s; T1 f/ q23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术) A6 `5 n0 S# N* p- c
第6篇 用PCR进行克隆! [1 O) B# S" G# A( C# D5 g
24 以PCR为基础的文库筛选方法% e m1 [3 V+ b5 [
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
9 r4 T- F% w4 [" j26 用PCR合成和分析DNA文库
3 Z% v! @* k1 o5 e7 {* {7 F第7篇 PCR产物的克隆
5 M' t# e* M9 N0 c/ Q+ L27 克隆PCR产物的策略
8 D9 M; y. E. i28 PCR产物双向和定向克隆
6 X9 i8 Y) J* N8 r7 B7 x29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建, T$ R, i4 z; B) G- `! p
第8篇 利用PCR进行诱变
s; R! N+ I) H, u30 诱变PCR! }7 R% X' j) J' j# Q4 x2 ?
31 快速PCR定点突变! _1 o; o% H; G$ ~' K
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因2 Q7 p C0 @- O7 t* X T# f7 E: e
33 流线型基因装配PCR: f5 f' s: K& j; ?# d
附录1 专利. O$ ^7 p# [: D! { a2 d0 @9 Y
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
& O" D9 ]0 V. c2 l# ~6 B6 x: |附录3 注意事项2 C3 j% X( _$ o o7 M% ?! V
附录4 供应商1 p8 Y% @5 [# W- j6 u
索引
& h/ \& `2 J& j# J3 f2 M ?0 N+ ?) d* K3 L9 m+ C' m# b) `
8 z7 r' S6 ~. o" l' s# P3 |
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