腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒三重荧光RT-PCR快速检...

wwwkkk83

　近期，广东省深圳市疾病预防控制中心，深圳市科技创新委重大传染病监控重点实验室，深圳市病原微生物资源库建立与应用公共服务平台研究人员发表论文，旨在利用荧光定量RT-PCR技术建立一种快速检测腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的方法。研究指出，建立的三重荧光可以快速、准确地检测腺病毒、合胞病毒和博卡病毒。该文发表在2014年第12期《热带医学杂志》上。
　　从Gen Bank随机下载腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的目的基因，通过MEGA分析，利用Primer Express3.0软件设计三对引物及其相应的Taqman探针，利用一步法RT-PCR来建立和优化反应体系。10倍稀释阳性对照，来检验建立体系的灵敏度和重复性。利用具有相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性。
　　建立了一个单管对腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒进行检测的三重荧光RT-PCR反应体系。该体系的检测灵敏度为102 copies/μl，扩增效率分别为92.24%、96.95%和99.70%，标准曲线的相关系数大于99%，重复性变异系数<3.5%，特异性实验未发现有非特异性扩增。
　　 相关链接： http://med.wanfangdata.com.cn/Journal/rdyxzz.aspx